摘要:毛酸浆是一年生草本植物(茄科酸浆属),又名洋姑娘,具有利尿、抑菌、化痰镇咳等功效,在我国主要分布于东北、...毛酸浆是一年生草本植物(茄科酸浆属),又名洋姑娘,具有利尿、抑菌、化痰镇咳等功效,在我国主要分布于东北、新疆、内蒙呼伦贝尔等地区。目前,国内外研究主要集中在毛酸浆多糖提取以及除杂工艺上,对其结构特性、生物活性以及构效关系等研究甚少。本文对毛酸浆多糖的化学组成、结构特征及抗氧化活性进行初步研究,探索其对STZ诱导的糖尿病小鼠的降血糖作用和机理,并对其进行分离纯化和结构鉴定。从而为毛酸浆多糖源功能食品的开发利用提供一定的理论依据。主要研究结果如下:(1)采用传统热水浸提法提取毛酸浆多糖(PP),多糖的提取率为5.32±0.45%。此多糖中的总糖、蛋白质、糖醛酸、硫酸根及总酚含量分别为79.43±0.36%、1.49±0.20%、14.5±0.27%、6.82±0.42%、0.96±0.09%;质均分子量为19959 Da,数均分子量为123174 Da、分散指数为1.38;单糖组成含有鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、岩藻糖(Fuc)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal),摩尔百分比分别为4.65%、17.34%、1.43%、6.24%、5.52%、45.50%和19.31%;生物活性研究表明毛酸浆多糖具有较好的DPPH自由基清除能力、氧自由基清除能力以及还原能力,还能显著地抑制α-淀粉酶的活性。(2)利用STZ诱导糖尿病小鼠模型,研究了毛酸浆多糖的降血糖功效。结果表明,通过连续灌胃毛酸浆多糖八周后,可以在一定程度上改善糖尿病小鼠的精神状态,缓解多饮多食多尿及消瘦症状,降低血糖,改善糖耐量,同时,高剂量毛酸浆多糖(800mg/kg/d)能够减轻因肝肾损伤造成的肝肾肿大,改善脾脏和胸腺的萎缩。结果提示,毛酸浆多糖具有降血糖功效效果和增强机体免疫调节的能力。(3)从毛酸浆多糖对糖尿病小鼠糖脂代谢的影响探讨其降血糖机制。结果发现,毛酸浆多糖能显著抑制糖尿病小鼠的胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)和尿素氮(BUN)水平升高和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)水平的降低,表明毛酸浆多糖能使糖尿病小鼠血脂紊乱情况得到一定的好转,肾脏损伤程度下降。高剂量毛酸浆多糖能明显升高C-肽水平,促进胰岛素分泌,增加肝糖原含量,提高糖无氧酵解途径关键酶葡萄糖激酶(GCK)活性,同时抑制糖异生途径中关键酶6-磷酸葡萄糖酶(G-6-Pase)活性,从而使糖尿病小鼠的血糖水平得以下降,减轻高血糖症状。(4)从毛酸浆多糖对糖尿病小鼠体内抗氧化防御系统的影响探讨其降血糖机制。结果发现,毛酸浆多糖能显著降低糖尿病小鼠肝肾中丙二醛(MDA)含量,增强抗氧化酶如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性和增加非酶抗氧化剂如VC、VE含量。结果提示,毛酸浆多糖在一定程度上能够提高STZ糖尿病小鼠肝肾的抗氧化防御系统的酶系活性和非酶系含量,提高其清除体内过量自由基的能力。(5)采用热水浸提法提取毛酸浆多糖,经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析分离纯化,得到一种中性多糖PP-1、两种酸性多糖PP-2和PP-3,其中PP-2的回收率最高,为33.14%,PP-1和PP-3分别为18.60%和6.12%。系统比较了PP-1、PP-2和PP-3在理化性质、结构、抗氧化以及对α-淀粉酶活性抑制等方面的差异。其中,PP-1的ORAC值最高,相对具有较好的抗氧化活性,PP-1对α-淀粉酶的抑制活性效果最好(高于阳性对照组阿卡波糖)。此外,PP-1具有三股螺旋构象,而PP-2和PP-3均不具有三股螺旋构象。经气相色谱分析,PP-1含有阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔百分含量为5.73%、0.68%、2.15%、2.67%、83.04%和5.75%。PP-2和PP-3均由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,但单糖含量存在差异,PP-2的单糖摩尔百分含量为6.00%、34、70%、14.01%、0.43%、1.12%、3.23%和40.51%,而PP-3为43.78%、13.92%、4.01%、0.39%、1.67%、5.26%和30.96%。经红外光谱分析,PP-1、PP-2和PP-3都具有多糖的特征吸收峰,PP-1和PP-2均具有呋喃型糖环,且同时有α-糖苷键连接和β-糖苷键连接存在,而PP-3则含有吡喃糖环,以α-糖苷键连接。更多还原显示全部