摘要：提取热纤梭菌（Clostridium．sp）基因组DNA，首次通过PCR克隆了该菌的β-葡聚糖酶基因全长。结果表明：该...提取热纤梭菌（Clostridium．sp）基因组DNA，首次通过PCR克隆了该菌的β-葡聚糖酶基因全长。结果表明：该基因全长1040bp，ORF为1003bp，编码334个氨基酸，计算分子质量为37．8kD，等电点为7．67。经Blast分析。谈序列与热纤梭菌同源性最高（99％），而与基因库中嗜热梭菌的同源性为94％，该基因已被GenBank接受（AY225318）。用Barn H Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切目的片段和表达载体pET-30a（＋）后相连接，构建重组表达栽体pET-clo，并导入BL21细菌中表达。酶学特性表明：SDS—PAGE电泳在37kD左右有表达蛋白带．该工程菌最适酶活29．4U/mL。是出发菌的15倍，最适温度80℃，最适pH9。该工程菌可作为耐热性材料构建耐热性好、酶活高的杂合基因工程菌．显示全部
