摘要：我国棕囊藻赤潮的频发,会生成有害泡沫物质,消耗水中溶解氧,释放藻毒素,严重破坏海洋生态系统,危害人类健康...我国棕囊藻赤潮的频发,会生成有害泡沫物质,消耗水中溶解氧,释放藻毒素,严重破坏海洋生态系统,危害人类健康。课题组前期已从珠海发生棕囊藻赤潮水体中分离得到一株能够抑制球形棕囊藻生长的芽孢杆菌B1,已鉴定出分泌的活性物质为咪唑丙烯酸、N-乙酰组胺、L-组氨酸。本论文在此基础上,进一步对这些纯抑藻物质在单一和联合胁迫下,对球形棕囊藻的抑藻效应、藻细胞的抗氧化系统及抑藻过程中细胞形貌和内部结构变化进行研究,并对球形棕囊藻抑藻前后藻细胞的溶血毒素活性、藻毒素组分的变化进行了测定。主要研究结果如下:（1）以96 h EC50为指标,三种化合物的抑藻效应强弱的顺序为:咪唑丙烯酸（8μg/mL）>N乙酰组胺（16μg/mL）>L-组氨酸（23μg/mL）。以AI值为判断依据,二元混合物咪唑丙烯酸+N-乙酰组胺对球形棕囊藻的具体联合作用方式为协同作用,而咪唑丙烯酸+L-组氨酸,N-乙酰组胺+L-组氨酸表现为拮抗作用。（2）对抗氧化系统研究表明,二元混合物N-乙酰组胺与+咪唑丙烯酸更有利于提高藻细胞的MDA含量、SOD和CAT活性水平,说明其藻细胞膜脂过氧化,膜系统和抗氧化系统被破坏。（3）FESEM和TEM观察结果表明含氮化合物会对藻细胞形貌和内部结构产生影响,而不同含氮化合物作用于藻细胞的位点有所区别。N-乙酰组胺主要是通过影响细胞膜渗透性造成质壁分离,而咪唑丙烯酸直接破坏藻细胞内部的叶绿体和细胞核。联合处理进一步证明了N-乙酰组胺与咪唑丙烯酸对球形棕囊藻的抑制存在协同作用。（4）对抑藻过程中球形棕囊藻毒素溶血活性变化研究表明:含氮化合物投加浓度为EC50（单一）和1:1 EC50（联合）时,抑藻至第5 d时,咪唑丙烯酸、N-乙酰组胺单一处理组及其联合处理组的溶血百分数相比对照组下降了37.6%,52.5%和67.5%。表明咪唑丙烯酸+N-乙酰组胺对棕囊藻细胞胞内毒素溶血活性影响较大。（5）通过HPLC和GC-MS对含氮化合物抑藻后棕囊藻的毒素检测,HPLC检测结果表明对照组和处理组藻毒素组分不变（均为8个）,但N-乙酰组胺和尿刊酸联合胁迫下则可以同时抑制组分4和组分1的合成,GC-MS检测结果则表明N-乙酰组胺+咪唑丙烯酸可抑制C17H32O2和C19H34O2两种组分的合成。表明咪唑丙烯酸+N-乙酰组胺能使棕囊藻合成脂肪酸的能力下降,从而降低毒性。更多还原显示全部
摘要：甲藻孢囊是甲藻失去鞭毛和游泳能力后,所形成的不动细胞。孢囊形成后会加厚细胞壁沉积于沉积物之中,进入甲...甲藻孢囊是甲藻失去鞭毛和游泳能力后,所形成的不动细胞。孢囊形成后会加厚细胞壁沉积于沉积物之中,进入甲藻生活史中特殊的休眠阶段。甲藻孢囊被认为是赤潮发生的种源,也是有毒有害甲藻全球扩散的载体。孢囊具有孢粉质壁,可在海洋沉积物中长时间保存,是海洋沉积物中重要的微化石群。沉积物中的孢囊可反映海洋环境变化历程,为追溯海区人类活动的影响以及海洋环境的变化提供有效信号。本研究在华南沿海的17个海域设置了94个采样点,其中包括广东沿海的柘林湾、汕头港、碣石湾、红海湾、大亚湾、大鹏湾、桂山岛、海陵湾、水东港、雷州湾和流沙湾海域,广西沿海的防城港和北海港海域,海南西北部沿海的海口港、马村港、洋浦港和八所港海域。采集了表层沉积物样品,对甲藻孢囊进行了定性定量研究,较为全面揭示了甲藻孢囊在华南沿海的地理分布状况,丰富了华南沿海甲藻孢囊地理分布信息;并通过查阅文献资料,绘制了甲藻孢囊在我国沿海的地理分布图;利用多种统计分析软件,研究了孢囊与海域富营养化、重金属污染以及赤潮发生的关系,揭示了孢囊对海洋环境的指示作用;采集了柘林湾186 cm柱状沉积物样品,通过孢囊的垂直分布以及生源要素、金属元素及沉积速率分析,揭示了近50年来柘林湾的环境变化,明晰了沉积物中孢囊集群对环境变化的响应。本研究揭示了甲藻孢囊对海洋环境的响应及其指示作用,研究结果对华南沿海生物多样性和海洋环境保护以及海洋资源的可持续利用提供了科学依据,研究结果显示如下:(1)在华南沿海17个典型海域94个表层沉积物中共鉴定甲藻孢囊34种,其中自养型甲藻孢囊12种,异养型甲藻孢囊22种;对34种甲藻孢囊进行了分类学研究,并建立了孢囊图谱,丰富了华南沿海甲藻孢囊的多样性,为今后孢囊研究提供了基础资料。(2)根据本调查结果及资料收集,绘制了34种孢囊在中国沿海的地理分布图,填补了甲藻孢囊在我国沿海分布信息。结果显示锥状斯氏藻是我国沿海最为常见的孢囊类型,有毒有害赤潮原因种塔玛亚历山大藻和链状裸甲藻的孢囊分布广泛,需要防范其赤潮的发生。珠江口海域和北海港为有毒有害赤潮原因种的孢囊密度高值区,而且沉积物中的孢囊多是未萌发的活孢囊,具有赤潮爆发的潜在可能。(3)近岸海域较高的沉积物粒径以及航道、港口、养殖活动所引起的水体扰动使孢囊密度较低,广东沿海表层沉积物中甲藻孢囊密度介于14-250 cysts/g D Wt之间,平均密度为69 cysts/g D Wt;广西沿海孢囊密度为70-571 cysts/g D Wt之间,平均密度为249 cysts/g D Wt;海南西北沿海孢囊密度为34-375 cysts/g D Wt之间,平均为109 cysts/g D Wt。(4)异养型甲藻孢囊的百分比含量较高,其中广东、广西以及海南西北沿海海域平均分别为52.8%、43.9%和71.2%,较低的甲藻孢囊密度以及较高的异养型甲藻孢囊百分比含量是工业污染、富营养化以及港口水体扰动的标志。(5)冗余分析(RDA)表明,BSi和Cd是影响广东沿海孢囊分布的重要因素,0.7%和0.114 mg/kg是BSi和Cd对孢囊分布产生影响的拐点;TN对广西沿海孢囊分布影响明显,而盐度则对海南西北沿海孢囊分布影响较大,拐点值分别为0.15%和31.42。(6)IndVal指示种分析显示,锥状斯氏藻、膝沟藻和锥形原多甲藻是指示粤中海域富营养化的指示孢囊,锥形原多甲藻孢囊则可用来指示粤东海域金属污染状况;透镜翼甲藻是指示广西沿海TN含量和富营养化的指示孢囊。锥状斯氏藻孢囊可作为盐度、富营养化以及水环境变化的有效指示种,指示受到多种人为活动干扰的环境变化。(7)柘林湾柱状沉积物中异养型甲藻孢囊含量的上升反映了柘林湾的富营养化进程,异养型甲藻孢囊对金属污染的耐受性也较高,同时富营养化也导致硅藻生产力的下降。甲藻孢囊、生源要素以及金属元素的垂直分布与柘林湾经济发展密切相关,近50年来柘林湾的环境变化可分为3个时期:第一阶段为1985年之前,生源要素和孢囊通量较低,金属元素基本和背景值相同;第二阶段从1985年到2000年代早期,在此期间富营养化程度提高,孢囊产量上升,金属污染加剧,但是硅藻生产力有所下降;第三阶段是2000年之后,孢囊密度、TOC和TN迅速的增加,而金属含量下降,显示环境有所改善。研究结果表明,华南沿海表层沉积物中的甲藻孢囊组成与分布可以反映不同人为活动所带来的水体富营养过程及环境变化历程,是指示海洋环境变化有效的生物学指标。更多还原显示全部
