摘要：从地鳖虫（Eupolyphaga sinesis Walke）中分离纯化出纤溶活性蛋白组分——地鳖虫纤溶活性蛋白（FibrinoIyr...从地鳖虫（Eupolyphaga sinesis Walke）中分离纯化出纤溶活性蛋白组分——地鳖虫纤溶活性蛋白（FibrinoIyric protein of Eupolyphage sinesis，EFP），研究其对血管生成的抑制作用。以新鲜地鳖虫为原料，采用硫酸铵分段盐析，经DEAE-纤维素和SephadexG-75柱等方法分离纯化EFP，用不同浓度的EFP作用于人微血管内皮细胞（MVEC），用MTT法测定EFP对MVEC增殖的影响，用单细胞凝胶电泳和AnnexinV—FITC／PI双荧光染色观察细胞凋亡情况，采用流式细胞术检测EFP对MVEC细胞周期的影响，并采用鸡胚绒毛尿囊膜的新生血管模拟肿瘤的新生血管，检测EFP对鸡胚尿囊膜（CAM）血管生成的作用。结果表明：1）MTT法测得EFP可抑制MVEC细胞增殖，增殖抑制率达46％；2）EFP可诱导MVEC细胞凋亡，且成剂量依赖关系，用单细胞凝胶电泳法检测细胞凋亡，随着EFP浓度的增大，拖尾细胞增多；用AnnexinV-FITC／PI进行双荧光染色发现，当EFP处理浓度达2μg/ml时，出现了大量凋亡晚期细胞；3）EFP可干扰MVEC的细胞周期，出现S期和G2／M期阻滞；4）用鸡胚尿囊膜实验观察到EFP剂量为0．06mg／egg即可抑制鸡胚尿囊膜血管生成，最高抑制率可达35．8％。提示地鳖虫纤溶活性蛋白组分具有抑制血管生成的作用。显示全部
