摘要:禽流感病毒是养禽业危害最严重的病原微生物之一。为探讨小干涉RNA(siRNA)对A型禽流感病毒复制的干扰作用...禽流感病毒是养禽业危害最严重的病原微生物之一。为探讨小干涉RNA(siRNA)对A型禽流感病毒复制的干扰作用,以H5亚型AIVPB2基因为靶序列。设计合成了4对编码siRNAs的DNA序列。将其克隆到psiRNA-hHlneo载体中,构建siRNAs表达载体,鉴定正确后将重组质粒转染MDCK细胞。采用G418筛选建立抗性细胞系,用血凝(HA)试验和real time RT-PCR试验检测抑制效果。在细胞水平筛选出具有高效抑制AIV复制的2个靶位点PB2-1154.PB2-342、为AIV的基因功能研究,抗病毒药物的开发和转基因动物的研究奠定了基础。显示全部