摘要：目的构建人β地中海贫血突变基因β41/42及具有调控功能的基因座控制区(LCR)重组载体,为该病基因治疗的体外...目的构建人β地中海贫血突变基因β41/42及具有调控功能的基因座控制区(LCR)重组载体,为该病基因治疗的体外细胞模型和转基因小鼠模型的建立奠定基础.方法抽提β41/42纯合子患者的DNA,PCR扩增人β珠蛋白基因座控制区(LCR)和β41/42基因,将其串联克隆至pcDNA3.1-中,酶切及测序鉴定重组载体.结果所构建的重组载体中含人β珠蛋白基因座控制区(LCR)和β41/42基因,测序结果及引入方向正确.结论成功构建了含5.5 kg β珠蛋白基因座控制区(LCR)的β41/42人重型地中海贫血基因的重组载体.显示全部
摘要：采用饱和蔗糖漂浮法、改良抗酸染色法和孢子化试验首次从广东某猴场的猴粪中分离到疑似环孢子虫卵囊.为了对...采用饱和蔗糖漂浮法、改良抗酸染色法和孢子化试验首次从广东某猴场的猴粪中分离到疑似环孢子虫卵囊.为了对其进行分子鉴定,采用巢式PCR和普通PCR方法,针对环孢子虫属18 S rDNA和ITS基因设计了3对引物,扩增其目的片段,并进行了序列分析.结果显示,卵囊大小为7.5～10 μm,经改良抗酸染色的卵囊染色程度不一,孢子化卵囊内含2个孢子囊,每个孢子囊内含有2个子孢子.通过PCR扩增,获得的18 S rDNA目的片段长712 bp,测序结果表明该猴源环孢子虫18 S rDNA基因与Cyclospora colobi、狒狒环孢子虫、人环孢子虫的相似率较高,在进化树上位于同一分支.获得的ITS-1＋片段长760 bp,其中ITS-1序列高度特异,在GenBank中未见同源性序列.结果表明,从猴粪中分离的疑似环孢子虫卵囊应属于环孢子虫.显示全部
