摘要：目的研究重组人乳铁蛋白（recombinate human lactoferrin，rhLF）对人口腔KB细胞增殖及凋亡的影响，为口腔...目的研究重组人乳铁蛋白（recombinate human lactoferrin，rhLF）对人口腔KB细胞增殖及凋亡的影响，为口腔癌患者提供新的有效治疗途径提供参考。方法采用CCK-8法检测不同浓度（0、12．5、25、50、100、200μg／mL）的rhLF分别处理KB细胞24、48、72h后对细胞增殖的影响；Immunofluorescence及Western blotting方法检测rhLF处理前后DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达。并分别用0、50、200μg／mL的rhLF处理KB细胞，14d后观察其对集落克隆形成的影响；0、200μg／mL rhLF处理KB细胞48h后，收集细胞并使用线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）检测rhLF处理前后线粒体膜电位的变化。Annexin V-PI染色检测rhLF对口腔癌KB细胞凋亡的影响；Western blotting检测0、50、200μg／mL的rhLF处理El腔癌KB细胞48h后Parp、Caspase-3的表达情况。结果mLF处理KB细胞的增殖有显著的抑制作用。Immunofluorescence结果显示rhLF处理后γ-H2AX的表达明显增加，Western blotting结果也显示rhLF处理后γ-H2AX的表达成浓度依赖性增加。rhLF抑制KB细胞集落克隆的形成；JC-1荧光检测结果表明红绿荧光的相对比例降低，这种红绿荧光的相对比例降低提示膜电位下降；0、50、200μg／mL的rhLF处理口腔癌KB细胞48h的凋亡率为2．02％、7．60％、48．07％；同时rhLF刺激口腔癌KB细胞能诱导Parp、Caspase-3的激活。结论rhLF能显著抑制KB细胞的增殖并且诱导其细胞凋亡，其机制与线粒体凋亡途径的激活应激有关。显示全部
