摘要：该论文从广东省稻瘟菌主要生理小种ZC<,13>(菌株97-151A)的菌丝细胞壁中分离、纯化到两种水溶性糖蛋白激发...该论文从广东省稻瘟菌主要生理小种ZC<,13>(菌株97-151A)的菌丝细胞壁中分离、纯化到两种水溶性糖蛋白激发子,用蛋白组学的方法对糖蛋白激发子进行鉴定,以CO39为背景的水稻抗稻瘟菌近等基因系为材料,与稻瘟菌97-151A组成完全非亲和互作(C101A51)、高度非亲和互作(C101LAC)、中度非亲和互作(C104PKT)和亲和性互作(CO39),对其中一种MGJ1糖蛋白激发子诱导抗病的性质及基因克隆进行研究.1、用压伤斑法处理水稻叶片表明,MGJ1激发子可以诱导不同亲和性互作水稻叶片的POD酶活明显增强.2、用液相色谱-电喷雾质谱(LTQ)鉴定MGJ1糖蛋白激发子是稻瘟菌(MAGNAPORTHEGRISEA)70-15染色体Ⅲ重叠群2954中MG05155.4开放阅读框(ORF)推测编码的HYPOTHETICAL PROTEIN MG05155.4,得分值为450.4,氨基酸残基数是449,平均分子量为48.9523 KDA,等电点是5.94.用MALDI TOF MS亦鉴定MGJ1激发子是HYPOTHETICALPROTEIN MG05155.4,两种方法鉴定结果相一致.3、用压伤斑法处理水稻叶片表明,MGJ2激发子可以诱导不同亲和性互作水稻叶片的POD酶活明显增强.4、用MALDITOF MS亦鉴定MGJ2激发子是稻瘟菌蛋白库中的HYPOTHETICAL PROTEIN MG07877.4,氨基酸残基数是718,平均分子量为78.67KDA,等电点是4.93.MGJ2激发子的质谱鉴定结果与N-端测序结果相一致.5、利用EXPASY蛋白质在线分析程序对HYPOTHETICAL PROTEIN MG05155.4及HYPOTHETICAL PROTEIN MG07877.4进行预测得知:HYPOTHETICAL PROTEIN MG07877.4在N-端含有潜在的信号肽,信号肽位于1-19个氨基酸,最可能的剪切位点是AWA<'18>-I<'19>.6、对MGJ1糖蛋白激发子的性质研究表明:该激发子性质稳定,能够诱导寄主水稻抗病相关酶活升高的最低有效浓度是1.5NMOL/L.7、根据LTQ和MALDITOFMS质谱鉴定MGJ1糖蛋白激发子的结果,从稻瘟菌中克隆到MGJ1激发子相关的基因组DNA片断(1414BP),利用RT-PCR技术克隆到MGJ1激发子相关的CDNA片断(1118BP),认为MGJ1基因着陆于MAGNAPORTHE GRISEA 70-15染色体Ⅲ重叠群2954中的MG05155.4ORF上.显示全部
