摘要：目的鉴定人肺特异性X蛋白（lung specific X protein,LUNX）基因的增强子及其调控活性。方法以人基因组DNA...目的鉴定人肺特异性X蛋白（lung specific X protein,LUNX）基因的增强子及其调控活性。方法以人基因组DNA为模板,PCR扩增生物信息学预测的3个增强子片段（E1：＋3770～＋3959bp;E2：＋6454～＋6555bp;E3：＋14553～＋14652bp）,通过荧光素酶报告基因表达体系检测转录活性。结果 PCR产物经测序证实后,分别定向连接至pGL3-Promoter载体中报告基因启动子上游的Kpn I和Xho I酶切位点和报告基因下游的BamHI和Sal I酶切位点上,经酶切鉴定后,构建了6种荧光素酶报告基因表达体系。以pSV-β-Galactosidase质粒为内对照,瞬时转染HEK293细胞,培养48h后检测细胞裂解液中荧光素酶活性。当3个DNA片段位于报告基因启动子上游时,均不具有增强转录的能力。将它们分别连接于报告基因下游时,E1和E3所调控的荧光素酶活性分别是对照pGL3-Promoter的2.83倍（P〈0.05）和1.59倍（P〈0.05）。结论 LUNX基因的＋3770～＋3959bp和＋14553～＋14652bp序列具有增强转录的能力,为LUNX表达调控机制的深入研究奠定了基础。显示全部
