摘要：基于SYBR Green Ⅰ技术的实时荧光定量PCR是目前定量检测核酸比较准确的方法之一。本试验目的是建立SYBR gr...基于SYBR Green Ⅰ技术的实时荧光定量PCR是目前定量检测核酸比较准确的方法之一。本试验目的是建立SYBR green Ⅰ实时荧光定量PCR检测巴马香猪TLR2 mRNA的方法。前腔静脉采血，提取外周血单核细胞RNA，反转录，连接载体后制作成标准品质粒。倍比稀释TLR2标准品质粒，建立PCR标准曲线，同时绘制融解曲线，并进行重复性和精密度评价。结果表明：TLR2标准品质粒的标准曲线符合线性要求，相关系数r2为0.9996，扩增效牢Ex＝95％;熔解曲线峰值单一，产物特异度较好。批内CV和批间CV分别为0.98％和2.29％，精密度和重复性较好。标准曲线的线性范围在7.1×107～7.1×102 copies／μL之间，说明本实验建立的方法能够在较宽范围内对目的基因进行检测。显示全部
