摘要：背景:人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）引起的获得性免疫缺陷综合征（Acquired immune ...背景:人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）引起的获得性免疫缺陷综合征（Acquired immune deficiency syndrome,AIDS,又称艾滋病）自20世纪80年代被发现以来迅速蔓延全球。近年来我国艾滋病新发病例上升的势头依然未能得到扭转,其中男男同性性行为人群（Men who have sex with men,MSM）疫情增长异常迅速,引起国内外广泛关注。中和抗体是机体针对HIV感染产生的主要免疫应答,如何诱导正常人体产生可中和不同毒株的广谱中和抗体（Broadly neutralizing antibodies,bNAbs）是设计、研发有效疫苗的基石和关键环节。新近研究表明,我国MSM人群中HIV-1流行毒株不断重组进化和扩散,正在给相关抗体、药物研究和应用带来重大挑战。目的:深圳作为国内MSM主要集散地和我国最大的口岸城市之一,建立bNAbs筛选分析平台并应用于本地MSM人群样本,为下一步开展基于本地流行毒株的bNAbs机制和应用研究奠定基础。方法:第一部分为搭建HIV-1广谱中和抗体筛查技术平台。培养扩增含标准HIV-env基因的系列质粒和骨架质粒（含env以外的HIV基因）,测序、酶切鉴定,然后分别将两种质粒共转染293T细胞,制备具有单次感染能力的假病毒;通过TZM-bl细胞实验检测假病毒滴定度,计算半数细胞感染量（TCID50）。第二部分为所建平台在本地MSM人群筛查中的初步应用和验证。包括建立小型MSM队列,按计划分别定期随访、留样,测序分析人群中HIV-1病毒流行亚型;利用平台筛选队列人群样本,检测平台的可行性;并对具有一定广谱中和能力的代表性血样进行抗体竞争实验初步分析其结合位点。结果:近年来,在深圳MSM人群中流行的HIV-1亚型CRF07BC（43.4%）和CRF5501B（15.4%）占比增长迅速。将来自该人群队列的CRF07BC感染者34人88份血样进行广谱中和抗体检测,筛选出具有一定广谱中和抗性的血样10份（ID50 Titer≧25）,其中2例显示了较佳中和宽度,可作用于全部12种假病毒中的7种（58.3%）。初步分析其结合机制均非靶向gp120。结论:随着深圳地区MSM人群中的HIV-1毒株不断进化,其流行特性日益复杂,对其中增长迅速重组亚型的bNAbs相关研究亟待加强。通过本研究已成功建立小型MSM队列和TZM-bl检测分析技术平台,并应用于实践,初步筛选结果提示部分具有中和活性的患者血清内存在bNAbs。更多还原显示全部
