摘要:利用16S rDNA克隆文库及限制性内切酶片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)技...利用16S rDNA克隆文库及限制性内切酶片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)技术分析脆肉鲩鱼在冷藏条件下的特定腐败菌。分别提取新鲜鱼肉及腐败的脆肉鲩鱼肉样品中的细菌总DNA并利用通用引物27F/1492R进行PCR扩增,所得PCR产物用于构建克隆文库,阳性克隆子用RFLP进行分析。结果表明:新鲜鱼肉的克隆文库中细菌种类比较丰富,达15种类型,而腐败鱼肉的细菌种类只有7种,且有2种分型的细菌占优势,共占克隆子总数的88.4%。序列比对分析表明,这2种优势菌的16S rDNA序列与假单孢菌属(Pseudomonas)细菌的核苷酸序列的相似性高达99%,说明脆肉鲩鱼在冷藏条件下的特定腐败菌是假单孢菌(Pseudomonassp.)。显示全部
摘要:利用16SrDNA克隆文库及限制性内切酶片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)技...利用16SrDNA克隆文库及限制性内切酶片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)技术,探讨了导致冷藏真空包装脆肉鲩鱼的特定腐败菌,为研发保鲜加工技术及质量监控提供参考及依据。通过提取冷藏腐败的真空包装脆肉鲩鱼肉的细菌总DNA,采用细菌16SrDNA通用引物27F/1492R进行PCR扩增,构建16SrDNA克隆文库,经RFLP分析、测序及序列比对后构建系统发育树。RFLP分析结果表明,冷藏腐败的真空包装脆肉鲩鱼肉中有12种不同分型的细菌种类,其中分型1和2占克隆子数的58.92%,是该条件下的优势菌;序列比对分析及构建的系统发育树显示,包括分型1和2的大部分克隆子的序列与气单胞菌属(Aeromonas)细菌的16SrDNA序列有最大的相似性,表明真空包装脆肉鲩鱼冷藏的特定腐败菌是气单胞菌(Aeromonas sp.)。显示全部