摘要：从GenBank下载禽流感病毒（Auian in fluenza virus，AIV）NP基因序列，通过比对选取NP基因中较为保守的片...从GenBank下载禽流感病毒（Auian in fluenza virus，AIV）NP基因序列，通过比对选取NP基因中较为保守的片段，设计1对引物，通过RT—PCR方法扩增270bp的目的片段，经测序确认目的片段序列正确后，用地高辛标记扩增产物制备探针。在BSl-3实验室，用AIV人工感染鸡胚成纤维细胞和SPF鸡后，制作细胞涂片和组织石蜡切片，然后在经前处理后的细胞涂片和石蜡切片上进行原位RT—PCR，再与地高辛标记的探针进行原位杂交，对细胞和组织中的AIV进行检测和定位。研究结果表明，本方法能检测出约1μg／L质粒的DNA，并能特异性地在细胞涂片和石蜡组织切片中检测和定位AIV，且成纤维细胞感染病毒8h后即可检测到阳性信号，具有良好的特异性和较高的敏感性，为动物组织中AIV的检测定位和致病机理研究提供了敏感、特异和更为直观的方法。显示全部
