摘要：Melting Temperature shift（Tm-shift）是一种新的基因分型方法,主要通过在两条特异性引物5′端加入不同长...Melting Temperature shift（Tm-shift）是一种新的基因分型方法,主要通过在两条特异性引物5′端加入不同长度的GC序列,PCR扩增后根据熔解曲线中产物Tm值的差异来完成分型。文章建立了Tm-shift法对2 048份样品的29个SNP进行分型,通过分型成功率、重复检测一致率、测序验证准确度综合评价分型效果。结果显示,29个SNP中有27个可以采用本方法分型,分型成功率为93.1%。测序验证准确性达到100%。3种基因型阳性标准对照重复检测一致率为100%;100个随机样品重复检测,重复性为97%。因此,Tm-shift基因分型法是一种成本低廉、准确灵敏、稳定可靠、通量灵活、操作简便的基因分型方法,可在遗传学研究中推广应用。显示全部
摘要：目的：建立检测胆固醇酯转运蛋白（cholesterol ester transfer protein，CETP）基因6种常见突变的等位基因...目的：建立检测胆固醇酯转运蛋白（cholesterol ester transfer protein，CETP）基因6种常见突变的等位基因特异性PCR技术。方法：应用针对CETP基因TaqIB（G→A）、1405V（A→G）、D442G（A→G）、R451Q（G→A）、A373P（G→C）和114A（G→A）这6种常见的突变位点设计的等位基因特异性PCR技术，对海南汉、黎族人群中CETP基因突变类型进行了检测，同时对经上述等位基因特异性PCR检测的样本进行序列测定。结果：在海南汉、黎族人群中，TaqIB（G→A）突变位点可检测出GG、GA、AA3种基因型，1405V（A→G）突变位点可检测出AA、AG、GG3种基因型，D442G（A→G）突变位点可检测出AA、AG2种基因型，但在海南汉、黎族人群中未检测到R451Q（G→A）、A373P（G→C）和114A（G→A）3种突变类型，用等位基因特异性PCR鉴定的CETP基因突变的基因分型结果与序列测定结果完全符合。结论：等位基因特异性PCR技术操作简便，重复性和稳定性好，可作为鉴定CETP基因突变类型的可行方法。显示全部
摘要：在器官和造血干细胞移植中准确的HLA配型是影响GVHD、GVL、存活率及存活时间的重要因素,2000年美国联邦政府...在器官和造血干细胞移植中准确的HLA配型是影响GVHD、GVL、存活率及存活时间的重要因素,2000年美国联邦政府立法,器官移植前必须进行HLA配型.PCR-序列特异性寡核苷酸(sequence specific oligonucleotide, PCR-SSO)探针方法是1994年报道的HLA分子生物学分型方法[1],本文报道在半量扩增体积基础上reverse-SSO技术.显示全部
