摘要：应用PCR方法亚克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物(Banana bunchy top virus Chinese Zhangzhou isolate,BBT...应用PCR方法亚克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物(Banana bunchy top virus Chinese Zhangzhou isolate,BBTV-ZZ)DNA 4非编码区(Po1)、主要共同区缺失片段(Po2)和主要共同区及茎环共同区都缺失片段(Po3),分别插入到植物表达载体pCAMBIA 1304的gfp::gus基因上游,替代椰菜花叶病毒启动子(CaMV 35S),得到重组质粒pTA2、pC26和PC45.通过Agroinfiltration法,将含pTA2、pC26、pC45和pCAMBIA 1304的根癌土壤杆菌(Agrobacterium tu-mefaciens)注射进烟草(Nicotiana tabacum L. cv.Xanthi NC)叶片,进行β-葡糖苷酸酶(GUS)和绿荧光蛋白(GFP)含量的瞬间表达分析.含有pTA2、pC26、pC45、pCAMBIA 1304和未注射的烟草叶片其GUS活性分别为1.007、0.852、0.939、2.069和0.021 pmol@MU/(μg@min);间接酶连免疫试验(ELISA)结果表明每毫克总蛋白中的GFP于490处的吸收值(A490)分别为89.577、65.184、72.096、100.440和3.287.以上表明Po1、Po2和Po3具有较强的启动子活性.此外,转基因烟草的GUS组织化学定位检测试验进一步表明Po1、Po2和Po3具有维管组织特异性.显示全部
