导　　师： 陈孝银

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 暨南大学

摘　　要： 目的：<br>　　湿邪是中医最常见外感病因之一，中医认为湿性粘滞，其致病多具有缠绵难愈，排泄粘滞不爽等特点。目前学者们主要通过免疫、胃肠功能等变化来研究湿性粘滞，而对其本质—①湿邪为什么会使疾病缠绵难愈，②为何会使排泄粘滞不爽等，未做深入研究。本研究通过建立不同环境中饲养的流感小鼠模型，并比较不同饲养环境对流感小鼠呼吸道微观结构、肠道菌群、TLR和RLRs免疫通路以及miRNA表达的影响，初步阐明中医“湿性粘滞”致病的两个特点及其本质。<br>　　方法：<br>　　参照课题组早期成功实验造模方法，采用流感病毒鼠肺适应株FM1病毒滴鼻建立小鼠流感模型，使用人工气候箱模拟正常、寒湿和湿热三种环境，将流感小鼠分别置于上述三种环境中饲养。1.验证小鼠流感感染造模成功与否，并观察造模成功后小鼠一般情况以及肺组织病理改变和微观结构；2.比较三种不同环境中流感小鼠肠道菌群改变，采用菌群记数检测小鼠大便菌群改变，如肠球菌、乳酸杆菌和厌氧菌的变化，从而阐明湿邪致病排泄物粘腻性的特点；3.比较三种不同环境中流感小鼠体内TLR7和RLRs免疫通路改变，取小鼠肺组织使用RT-PCR和Western Blot技术检测TLR7和RLRs信号通路相关mRNA和蛋白的表达，从而阐明湿邪环境对流感小鼠天然性免疫应答的影响；4.比较三种不同环境中流感小鼠体内辅助性T淋巴细胞亚群及细胞因子改变，采用流式细胞术检测小鼠T细胞亚群Th1/Th2和Th17/Treg细胞比例，并同时采用抗体芯片技术检测小鼠肺组织Th/Treg细胞相关细胞因子的变化，从而阐明湿邪对机体获得性免疫的影响；5.比较三种不同环境中流感小鼠体内miRNA改变,使用miRNA芯片技术，通过对肺组织差异miRNA进行分析，找到差异性的miRNA，并进行miRNA表达水平�

关 键 词： 湿邪致病 流感 肠道菌群 免疫识别 动物模型 温度湿度变化

领　　域： [医药卫生—临床医学] [医药卫生—中医基础理论]