导　　师： 范燕萍

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 植物的香味是由其含有的不同挥发性物质所决定的,这些物质可分为三大类:萜类、苯基/苯丙烷类、脂肪酸衍生物。其中香味主要组分是萜类化合物,萜类化合物是由数个五碳化合物异戊二烯单位构成,根据数目不同可分为单萜、倍半萜、二萜和三萜等.姜花中含有大量的萜类物质,是进行萜类物质研究的较好材料.本研究以单子叶植物白姜花为材料,根据萜类合成酶同源基因的结构特点设计引物,通过采用RT-PCR及RACE技术,在姜花中克隆到萜类合成酶基因,并对花中克隆到的基因进行了表达分析和功能验证的初步探索.结果如下: 1.采用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱(GC-MS)技术,鉴定处于花蕾期、始花期、盛花期和衰老期白姜花的香味组分的结果表明,白姜花的香味组分共有49种,主要成分为单萜类、倍半萜类、酯类、酮酚类,其中单萜类化合物含量随着花的发育而逐渐增多.根据香气阀值及其贡献大小,初步确认,L-沉香醇、1,8桉油醇、3,7-二甲基-1,3,7-辛三烯为白姜花的特征香气. 2.利用RT-PCR与RACE相结合的方法,在姜花的花中克隆得到一个单萜合成酶基因的cDNA全长序列,并命名为Hc-monotps一个萜类合成酶基因(命名为Hc-tps1)的片段,并得到它的3,端序列.Hc-monotps基因全长为2145bp, ORF全长1728bp,编码576个氨基酸.该基因编码的氨基酸序列含有单萜合成酶的保守序列:DDXXD和RRX8W.基因的系统进化分析表明Hc-monotps基因属于含有砌RRX8W结构的植物萜类合成酶基因家族中的Tps-b亚族的单萜合成酶.Hc-tps1编码的氨基酸序列也含有DDXXD保守序列,属于萜类合成酶. 3.利用RT-PCR与RACE相结合的方法,在姜花的叶中克隆得到一个倍半萜合成酶基因的cDNA全长序列,命名为Hc-sesquitps;一个萜类合成酶基因(命名为Hc-tps2)的片段,并得到它的3'端序列. Hc-sesquitps基因全长为1932 bp,ORF全长1653 bp,推导�

关 键 词： 姜花 萜类合成酶 基因克隆 基因表达 功能验证

领　　域： [农业科学—观赏园艺] [农业科学—园艺学] [生物学—植物学]