导　　师： 魏连波

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的:骨骼肌萎缩是慢性肾脏病(Chronic kidney disease，CKD)的常见严重并发症。越来越多研究表明氧化应激(Oxidative stress，OS)和自噬是参与调节骨骼肌萎缩的重要分子机制。前期研究发现肾衰营养胶囊可以减轻OS及自噬改善CKD骨骼肌萎缩，但是由于中药复方成分复杂，难以进入细胞，缺乏充分的体外机制研究，不利于中药进一步的标准化和优化。毛蕊异黄酮是复方中黄芪的主要有效成分，现代药理学研究表明其具有抗炎、抗氧化、抗自噬等作用，但其在CKD骨骼肌萎缩中的作用尚不明确。本文旨在研究毛蕊异黄酮对CKD骨骼肌萎缩的作用及分子机制。　　方法:采用5/6肾切除术(5/6Nephrectomy，5/6Nx)制作CKD大鼠模型，用肾衰营养胶囊(SSYYJN)对CKD大鼠进行灌胃，提取骨骼肌中mRNA，进行转录组学测序分析差异性表达基因，用qRT-PCR和western blot验证共激活因子相关的精氨酸甲基转移酶l(co-activator associated arginine methyltransferase1，CARM1)水平变化。通过siRNA干扰技术，构建siRNA-CARM1干扰质粒，转染到C2C12小鼠成肌细胞;用肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)诱导C2C12损伤，通过检测细胞活性、凋亡比例、抗氧化酶活性、自噬基因表达及肌萎缩基因水平等，明确CARM1对C2C12细胞的影响。再采用分子对接从SSYYJN的有效成分中预测出能与CARM1活性区域结合的小分子药物，筛选出最优的中药单体。以血清肌酐(Serum creatinine，Scr)、血尿素氮(Blood urea nltrogen，BUN)、血清白蛋白(Serum albumin，ALB)、血红蛋白(Hemoglobin，Hb)、肾脏组织病理学形态、大鼠体重、骨骼肌质量、肌横截面积、肌肉特异性环指蛋白1(Muscle-specific RING finger protein1，MuRF1)和肌肉萎缩盒F基因(Muscle atrophy F-Box，MAFbx)等指标，评估毛蕊异黄酮和开同（阳性对照组）对CKD大鼠肾脏及骨骼肌萎缩的疗效;以超氧化物歧化酶

关 键 词： 骨骼肌萎缩 毛蕊异黄酮 实验药理 慢性肾脏病

领　　域： [医药卫生—骨科学] [医药卫生—外科学] [医药卫生—临床医学]