导　　师： 孙峪

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 呕吐毒素又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON），属单端孢霉烯族化合物，由于它可以引起猪的呕吐反应而得名。呕吐毒素DON主要污染粮食作物和饲料，并通过食物链摄入或直接接触等方式进入动物或者人体内引起各种中毒症状和疾病。肠道是人体最大的免疫器官，同时也是DON的首要靶器官。DON会损伤肠道屏障功能及破坏肠道菌群，诱发肠炎的发生发展，严重威胁畜禽健康养殖及人类健康。然而DON诱发肠炎的发生机制尚待阐明。本实验室前期研究基础发现，DON可诱导小鼠肠道高表达钙结合蛋白S100A8和S100A9，S100A8/A9被视为肠道炎症中有价值的生物标志物，S100A8和S100A9不仅参与炎症反应过程，同时具备抑菌功能，这提示DON诱导S100A8和S100A9高表达，可能会进一步破坏肠道菌群的紊乱，加剧肠道炎症的进程。因此，本研究旨在探索DON诱导S100A8和S100A9的分子机制及其对肠道微生物的影响，阐述DON诱发肠炎的潜在机制，为DON的防治提供理论基础。　　首先通过构建体外肠道细胞屏障模型，建立了包括肠上皮细胞Caco-2，树突状细胞MUTZ-3DCs和巨噬细胞U937三种细胞的3D共培养体系。结果表明DON能够增加肠道屏障通透性，使得跨膜电阻（Transepithelial electrical resistance，TEER）值显著下降，利用酶联免疫吸附剂测定（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测发现S100A8，S100A9和炎症因子IL-6，TNF-α含量显著上调，该结果明确了DON诱发肠道炎症同时会产生S100A8和S100A9。为进一步探索DON诱导S100A8和S100A9表达的分子机制，我们选择单核巨噬细胞系U937作为细胞模型，用MTT实验确定DON对U937的IC50为0.63μg/mL。用不同浓度DON处理U937细胞12h，发现DON上调S100A8和S100A9的表达，且具有剂量依赖性。利用免疫印迹和细胞核质分离实验，发现DON激活p38的磷酸化以及NF-kB，并且可

关 键 词： 肠炎 呕吐毒素 病理进程 蛋白 蛋白 分子机制

领　　域： [医药卫生—内科学] [医药卫生—临床医学]