导　　师： 林浩然;李文笙

学科专业： G0703

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 中山大学

摘　　要： 生长抑素(somatostatin，SS)是一种抑制脑垂体分泌生长激素(growth hormone，GH)的神经调节肽，广泛分布于脊椎动物中枢和外周神经组织，参与机体的生长、发育和代谢等多种生理功能。目前的研究表明，SS的表达受雌激素和半胱胺的影响。尽管这种调节存在种属间的差异，但是对其调节的作用机制并不清楚。 本研究首次从斜带石斑鱼克隆了生长抑素前体基因Ⅰ(preprosomatostatin I，PSSI)5'上游启动子序列，构建了5’端长度逐渐缺失的荧光素酶报告基因载体，瞬时转染人乳腺癌细胞系(MCF-7)，大鼠肾上腺嗜铬细胞系(PC12)和褐鼠胰岛素瘤上皮细胞(RIN-m)，采用双荧光素酶检测系统测定不同DNA片段的转录调控活性;通过在体注射和离体孵育实验，研究了17β-雌二醇(E2)对斜带石斑鱼PSSI mRNA表达的调节及其对PSSI基因上游启动子区转录活性的影响;研究了半胱胺盐酸盐(CSH)对离体斜带石斑鱼PSSI基因的调节及其上游启动子区的影响以及PKA和MAPK信号通路在CSH调节PSSI基因表达中的作用。主要研究结果如下： 1.采用GenomeWalker的方法，成功的从斜带石斑鱼肝脏中克隆得到PSSI基因5’旁侧848 bp序列。与斜带石斑鱼PSSI cDNA5'—RACE序列进行比对后发现，转录起始位点A位于翻译起始位点ATG上游53 bp处。距离转录起始位点约29 bp存在一个TATA框(TATAA)。经网上转录因子分析系统TESS软件分析后发现，斜带石斑鱼PSSI基因5’旁侧序列存在CRE、C/EBP、SP1、AP1、NF-1、1/2 ERE等转录因子结合元件位点。与大鼠约900bp的PSSI启动子序列比较后发现，AP—2、AP—3、SRY和1/2 ERE结合位点仅存在于斜带石斑鱼PSSI启动子中，在大鼠PSSI启动子中并未发现这些潜在的转录因子结合位点。 2.构建了5’端长度逐渐缺失的启动子报告基因重组体，并转染PC12、MCF—7和RIN—m细胞，用双荧光素酶报告系统检�

关 键 词： 石斑鱼 半胱胺 生长抑素 雌二醇

领　　域： [生物学—动物学]