导　　师： 凌莉

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 暨南大学

摘　　要： 目的：本项目拟研究PD-L1单克隆抗体治疗对脑梗死后远隔部位M1/M2型小胶质细胞极化的影响及其作用机制，期望通过抑制PD-L1的免疫治疗来防治脑梗死后的远隔损伤，为临床治疗脑梗死、促进神经功能恢复提供新的思路和理论依据。　　方法：选用8-12周龄的C57BL/6雄性小鼠122只，采用双极电凝器闭塞左侧大脑中动脉远端(distal middle cerebral artery occlusion，dMCAO)方法制作脑梗死模型。将小鼠先分为手术组和假手术组，每组6只，术后第7天通过实时荧光定量PCR检测梗死后同侧丘脑腹后外侧核（Ventral posterior nucleus，VPN）的PD-1及PD-L1mRNA的表达。剩余小鼠随机分成PD-L1抗体治疗组、溶剂对照组和假手术组，每组36只。每组小鼠分别在造模后第3天、第7天和第14天行神经功能评分，一部分通过免疫荧光检测梗死后同侧丘脑VPN内活化小胶质细胞的数量。另一部分采用Western Blots检测梗死后同侧丘脑VPN内iNOS和Arg-1的蛋白表达，实时荧光定量PCR检测梗死后同侧丘脑VPN的促炎因子（IL-6、IL-1β及TNF-α）和抗炎因子（IL-4、IL-10及TGF-β）。另随机选取2只未做处理的dMCAO小鼠用TTC染色鉴定皮层脑梗死。　　结果：与假手术组比较，dMCAO术后第7天小鼠脑梗死后同侧丘脑VPN内PD-1及PD-L1的表达增多（p<0.05）。与溶剂对照组比较，PD-L1单克隆抗体治疗能改善脑梗死后神经功能，减少远离梗死灶同侧丘脑VPN内Iba-1+小胶质细胞数量。在术后第7、14天，PD-L1抗体能下调梗死后同侧丘脑VPN的M1型小胶质细胞内iNOS的表达（p<0.05），显著降低其促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌（p<0.05），而在术后第3天，PD-L1抗体能上调M2型小胶质细胞内Arg-1的表达（p<0.05），增加抑炎因子IL-10的分泌（p<0.05）。　　结论：PD-L1单克隆抗体治疗可抑制小鼠大脑皮层梗死后同侧丘脑VPN内M1型小胶质细胞极化，从而减轻�

关 键 词： 脑梗死 远隔损伤 程序性死亡因子 配体 单克隆抗体 小胶质细胞极化 疗效评价

领　　域： [医药卫生—神经病学与精神病学] [医药卫生—临床医学]