导　　师： 林浩然

学科专业： G1004

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 中山大学

摘　　要： 本文采用RT-PCT方法和cDNA末端快速扩增技术(RACE)，从鲤鱼(Cyprinuscarpio)全脑和下丘脑总RNA中进行扩增，得到鲤鱼GalanincDNA全序列。该cDNA全长有两种形式，Ⅰ型GalanincDNA全长680bp，Ⅱ型614bp。Ⅰ型ORF为429bp，所编码的前体Galanin蛋白为142个氨基酸;Ⅱ型ORF为357bp，所编码的前体Galanin蛋白为118个氨基酸，包括32个氨基酸的信号肽(SignalPeptide)、Galanin成熟29肽和Galanin信息联合肽(Galaninmessageassociatedpeptide，GMAP)。同源性分析表明，鲤鱼与金鱼(Carassiusauratus)同源性最高，与哺乳动物同源性较低。进化树分析表明，鲤鱼Galanin与同为鲤科的金鱼Galanin在同一进化支上，与鸟类、哺乳动物不在同一分支。 采用两步法RT-PCR对Galanin在鲤鱼成体各组织的表达情况进行了初步的研究。成体组织分布结果显示，Galanin在不同脑区都有表达，但在延脑、中脑、嗅球、下丘脑等的表达丰度比其他脑区高;在外周组织的卵巢、肝脏、心脏、皮肤、前肠、中肠、后肠、脾脏、精巢也能检测到有Galanin表达。实验结果表明，Galanin作为神经激素调节促性腺激素的分泌，对下丘脑—垂体—性腺轴其生殖调控作用，也可能作为神经递质和神经调质、自分泌和旁分泌调节因子，参与鱼类神经内分泌的其他活动。 为了更好地了解Galanin在鲤鱼中的生理功能，我们利用PCR方法从鲤鱼全脑和下丘脑总RNA克隆了Galanin受体Ⅰ(GalR1)的cDNA全长序列。GalR1cDNA全长为1757bp，，编码区1041bp，编码一条346个氨基酸的多肽链。经过SMART分析，鲤鱼GalR1是一个七次跨膜蛋白。同源性分析表明，鲤鱼GalR1与斑马鱼GalR1同源性最高。进化树分析表明，鲤鱼GalR1与斑马鱼在GalR1在同一分支，而哺乳类GalR1则在另一分支，此结果与同源性比较相一致。 采用两步法RT-PCR对Galanin受体1在鲤鱼成体各组织的表达情况进行了初�

关 键 词： 鲤鱼 甘丙肽受体 氨基酸序列 脑区表达

领　　域： [农业科学—水产养殖] [农业科学—水产科学] [生物学—分子生物学]