导　　师： 庞义;蒲蛰龙

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 中山大学

摘　　要： 斜纹夜蛾(Spodoptera litura)是中国和东海南亚地区粮、棉等经济作物及蔬菜上的 重要害虫.应用斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura multinucleocapsid nuclear polyhedrosis virus,S1MNPV)防治余纹夜蛾目前已在一些地方推广.该文主要报道S1MNPV高 敏感克隆细胞株的筛选和建株、egt基因的克隆与序列分析及其不同基因型毒株非必需DNA片段的体外研究.该研究对斜纹夜蛾胚胎细胞系ZSU-SL-1进行克隆.从154孔单细胞繁殖的细 胞集落中,经多次传代后成为单克隆细胞株.不同的克隆细胞株的形态明显不同,且对S1MNPV的敏感性有很大的差异.其中两株克卫细胞株,分别命名为SL-1-1D11和SL-1-2H8,是高 敏感性的,约有80ˉ90%的细胞可以正常复制出多角体,而野生型的S1MNPV感染ZSU-SL-1细胞系,仅约5%左右的细胞自我帽出子代多角体.然而,在感染的这两株克隆细胞株中复制 的病毒其多角体其形态和数量都不同.SL-1-1D11第每个细胞中的多角体达40ˉ60个,形大;而SL-1-2H8则只有10ˉ20个,形小.用不同基因型的病毒S1MNPV-W579和S1MNPV-W46感染 这两株细胞,均得到相似结果,说明这种不同克隆细胞株中子代病毒的复制特性可能是由其本身性南所决定的.SDS-PAGE分析表明,SL-1-1D11和SL-1-2H8克隆株与ZSU-SL-1细胞系的 蛋白带型有明显不同,前两者至少有两条蛋白带(48KD和50KD)的含量明显增加.糖蛋白染色分析证明这两种蛋白为糖蛋白,可能与克卫细胞株SL-1-1D11和SL-1-2H8相对于亲本细胞系SL-1对病毒感染力的提高有关.该研究对S1MNPV蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶(Ecdysteroid UDP-glucosyl-transferase,EGT)基因进行了定位、克隆和全序列分析.

关 键 词： 杆状病毒 克隆细胞株 病毒复制 斜纹夜蛾核多角体病毒 甜菜认蛾核多角体病毒 基因

领　　域： [生物学—昆虫学]