导 师: 曹伟胜
授予学位: 硕士
作 者: ;
机构地区: 华南农业大学
摘 要: 禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)是一种宿主为禽类的具有传染性的反转录病毒,临床上主要引起禽类发生良性或恶性肿瘤、免疫抑制、产蛋率下降、体重减轻和死亡等。鸡禽白血病病毒主要有A、B、C、D、E、J和K共7个亚群,其中ALV-K 是近几年新发现的一个亚群。目前分离到的 ALV-K 毒株可分为外源性 LTR ALV-K和内源性LTR ALV-K。外源性LTR ALV-K分离自芦花鸡肿瘤病例样本,而内源性LTR ALV-K分离株在不同国家均有报道,其复制能力弱,还没有致肿瘤病例的报道。此外,本课题组对SPF鸡肝脏样品进行的转录组学数据分析表明,内源性LTR ALV-K感染可引起ERK/MAPK信号通路富集,而ERK/MAPK信号通路与肿瘤的密切相关。因此,本研究拟探析内源性LTR ALV-K感染过程中ERK/MAPK信号通路激活的作用。 为明确内源性LTR ALV-K的感染和致病性,对一株分离自健康种鸡群的内源性LTRALV-K GD1601株进行研究。103TCID50/0.2 mL ALV-K GD1601和ALV-J CHN06株体外感染DF-1细胞试验发现,第1、3、5和7DPI(Day Post Infection)时,GD1601病毒滴度均显著低于CHN06(P<0.05);103TCID50/0.2mL ALV-K GD1601腹腔接种1日龄SPF鸡,49 DPI时,SPF鸡泄殖腔排毒阳性率达到最高为33.3%(4/12)。第7 DPI和14 DPI时,ALV-K攻毒组仅有同一只鸡(1/15)为DF-1细胞病毒血症阳性。除此以外,试验期内其余鸡均为病毒血症阴性;在第49、63、77和91 DPI对鸡外周血单核细胞提取总RNA进行RT-PCR检测的结果中,阳性率在33.3%~77.8%之间,且同居组的3只鸡最多检测到2只鸡为阳性。第91 DPI时,用所建荧光定量PCR对 SPF 鸡组织脏器的检测中,以肺、肾和腺胃有较高的载毒量,但试验期内 ALV-K GD1601株对SPF鸡的增重无显著影响,且感染组无肿瘤病例。 为了定量分析ALV-KRNA合成水平,建立了基于SYBR Green I荧光定量PCR检测ALV-K的方法。该方法对禽�