中文会议： 中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会第一次学术大会论文摘要集

会议日期： 2020-12-04

会议地点： 中国广东广州

出版日期： 2020-11-30

作　　者： ;

机构地区： 广东医科大学

出　　处： 《中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会第一次学术大会》

摘　　要： 目的:在氢醌诱导的TK6恶性转化细胞和苯暴露工人,探讨长链非编码RNA(lncRNA) FAS-AS1与DNMT3b相互调控作用机制及其对FAS基因的表达影响的分子机制。方法:以正常的TK6淋巴母细胞和氢醌诱导的TK6恶性转化细胞、120例苯作业工人及其对照为苯暴露研究对象;反转录实时荧光定量PCR检测白血病相关长链非编码RNA、mRNA的表达;蛋白质免疫印迹法检测蛋白质的表达;CRISPR/CAS9双载体慢病毒转染系统构建DNMT3b敲除细胞,慢病毒表达系统建FAS-AS高表达细胞;CCK-8法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞凋亡;裸鼠体内成瘤实验检测细胞恶性程度改变,HE染色和免疫组化分别检测肿瘤块的病理学改变和蛋白质表达;染色质免疫沉淀(ChIP)检测基因启动子区的DNMT3b、组蛋白和乙酰化修饰情况。结果:在氢醌诱导的恶性转化TK6细胞和苯暴露工人中,lncRNAFAS-AS1的表达量下降。在TK6恶性转化细胞中,过表达的FAS-AS1能促进细胞凋亡,抑制雌性裸鼠皮下肿瘤的生长,抑制DNMT3b和SIRT1的表达,促进FAS、H3ac和H3k27ac表达。DNMT3b和SIRT1在TK6恶性转化细胞中的表达量上升,DNMT3b在FAS-AS1启动子区的富集,但H3k27ac的富集减少,从而抑制了FAS-AS1的转录表达,但是在敲除DNMT3b的TK6恶性转化细胞细胞出现了相反的结果。我们更发现了FAS-AS1和DNMT3b在苯暴露人群中表现出相互抑制的状态。分析苯暴露时间1.5年以内的17位工人的血液标本后发现DNMT3b的表达下降,而暴露时间1.5年以上的103位工人中的表达却是上升的,FAS-AS1的表达趋势与DNMT3b的是刚好相反的,DNMT3b与FAS-AS1的表达呈负相关。FAS-AS1和DNMT3b通过调控SIRT1的表达从而增加H3k27ac在FAS基因启动子区的富集程度,从而上调FAS基因的表达。结论:苯相关的致癌过程,FAS-AS1和DNMT3b之间存在相互抑制的调控环,FAS-AS1通过调控FAS基因的表达,乙酰化修饰在此过程发挥重要作用。

领　　域： [医药卫生—肿瘤] [医药卫生—临床医学]