导　　师： 郑利民

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 中山大学

摘　　要： 重组痘苗病毒具有宿主范围广，基因容量大和安全性好等优势，能诱发较强的体液免疫和细胞免疫应答，因此被认为是肿瘤生物治疗的理想载体。MVA是高度减弱的痘苗病毒株，可作为安全有效的疫苗载体。树突状细胞(Dendritic Cell)是体内功能最强的抗原呈递细胞，能直接激活幼稚T细胞并有效诱导抗肿瘤免疫应答。目前关于MVA痘苗病毒对DC功能的影响尚不完全清楚，但是有报道痘苗病毒感染可抑制DC成熟并诱导其凋亡。这一特性很可能会影响痘苗病毒作为肿瘤免疫治疗载体的疗效。因此，本课题拟系统的研究MVA痘苗病毒载体对DC表型和功能的影响，并希望能通过构建重组载体来克服MVA作为肿瘤疫苗的固有缺陷。我们首先构建了表达肿瘤特异性抗原Survivin和同时表达Survivin及IL-2双基因的重组MVA痘苗病毒载体，检测了该载体对DC表型、功能以及病毒感染后DC对自体T细胞的凋亡、增殖和活化的影响。结果表明，各组MVA感染均能上调iDC表面成熟标记CD83和共刺激分子CD80、CD86的表达并促进iDC的活化;这些DC经LPS刺激后的成熟受到轻度抑制，但仍能高水平表达重组蛋白。重组MVA载体感染能使DC分泌更多的TNF-α，同时IL-10的表达降低。各组感染的DC与自体T细胞共培养，均能有效诱导T细胞增殖，激活细胞毒性T淋巴细胞。vD10组(含Survivin及IL-2双基因)与vSur组、空载体v65组相比，能显著降低T细胞的凋亡、提高T细胞的增殖能力和活性，并在体系中产生大量IL-2和IFN-γ。结论：重组MVA感染尽管能抑制DC成熟，但并不影响DC刺激免疫应答的功能。更重要的是，重组MVA联合IL-2共表达能更显著地加强DC刺激免疫应答的功能。本研究为Survivin和IL-2双基因重组痘苗病毒疫苗的临床研究提供了实验依据，同时也为进一步优化重组MVA抗肿瘤疫苗提供了理论基础。

关 键 词： 痘苗病毒载体 树突状细胞 免疫治疗 细胞毒性 细胞 肿瘤生物治疗 免疫应答

领　　域： [医药卫生—肿瘤] [医药卫生—临床医学]