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珍禽ALV病原学调查及分子检测方法研究

导  师: 曹伟胜

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 禽白血病(Avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起禽类的某些细胞恶性增生的肿瘤性疾病的统称。近几年,AL宿主范围有不断扩大趋势,从最初的白羽肉鸡扩散到蛋鸡和地方品系鸡,甚至还感染野生鸟类、水禽等。国内对珍禽感染禽白血病的相关报道很少;广东省历来有规模化养殖珍禽的传统,但未进行过珍禽禽白血病病毒感染情况的系统性调查。本研究拟对广东省内的规模化七彩山鸡种禽场和鹌鹑场开展ALV病原学调查,从而为制定适合规模化珍禽场禽白血病等蛋传递性疾病的防控措施提供依据。本研究通过病毒分离、ELISA、PCR、囊膜基因测序等方法对3个规模化的七彩山鸡种禽场和1个鹌鹑场进行ALV病原学调查。从广东的A、B、C 3个七彩山鸡种禽场分别采集60、126、50份的血浆样品和D场采集30份鹌鹑血浆样品,进行基于CEF和DF-1细胞的病毒分离。经ALV-p27 ELISA检测结果表明,接种于DF-1细胞的ALV阳性率分别为:1.6%(1/60)、6.3%(8/126)、4%(2/50)、0%(0/30);接种于CEF细胞的检测阳性率分别为:5%(3/60)、4%(5/126)、4%(2/50)、0%(0/30);PCR扩增和囊膜基因测序结果表明,从266份血浆样品中分离到4株ALV-F、4株ALV-J和3株ALV-E,将其名为FGD1801~FGD1804、JGD1801~JGD1804及EGD1801~EGD1803。这是首次从华南地区七彩山鸡中发现ALV-F的存在。为了解11个七彩山鸡源ALV分离株的遗传进化特点。通过囊膜基因测序和利用Megalign软件对各分离株gp85基因序列进行相似性和遗传进化分析。结果表明ALV-F分离株FGD1801、FGD1802、FGD1803、FGD1804的gp85基因核苷酸序列之间的相似性为90.6%~96.2%,与ALV-F参考毒株的相似性为91.5%~99.3%,且在同一进化分支上,而与其他各亚群的相似性为45.9%~64.9%;ALV-E各分离株EGD1801、EGD1802、EGD1803的gp85基因核苷酸序列的相似性为99.6%~99.9%,与ALV-E参�

关 键 词: 珍禽 病原学 调查 分子检测

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