导　　师： 黄翔鹄

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广东海洋大学

摘　　要： 波吉卵囊藻(Oocystisborgei)是高位对虾养殖池塘中后期常见优势种，其种群稳定适应能力强，能有效降低养殖池塘水体中氨氮和亚硝态氮等有害物质，在对虾养殖水体调控方面发挥着重要作用。十多年来，实验室开展了波吉卵囊藻的培养生物学的研究和应用推广，其应用价值已经在对虾养殖中得以体现，但目前国内外对其分子生物学研究几乎空白，同时缺少相应的研究工具。因此本文以波吉卵囊藻作为实验材料，首次尝试通过基因工程技术手段构建其遗传转化体系，并对波吉卵囊藻进行了转录组测序与分析，从而为波吉卵囊藻的分子生物学相关研究提供工具和依据。研究内容和结果如下：　　(1)本研究通过测定藻体生物量、叶绿素含量及观察藻液颜色变化，综合评定了波吉卵囊藻对10种抗生素的敏感性。结果表明：①波吉卵囊藻对博来霉素非常敏感，25μg/mL的博来霉素即能完全抑制藻体生长，叶绿素含量极显著低于对照组(P＜0.01)，藻体颜色发黄变白，可作为波吉卵囊藻遗传转化中的筛选试剂;②红霉素和氯霉素各浓度的处理都会使藻体生物量和叶绿素含量极显著降低(P＜0.01)，但是溶解红霉素和氯霉素的乙醇溶剂会对藻体生长产生抑制，不适用作筛选试剂;③波吉卵囊藻对氨苄青霉素、遗传霉素、庆大霉素、羧苄青霉素、青霉素以及卡那霉素不敏感，这几种抗生素甚至在一定的浓度内还会促进藻体的生长和/或叶绿素含量的提升。此外低浓度的链霉素亦可促进藻体叶绿素含量的提升。④在固体培养条件下3μg/mL的博来霉素即能抑制波吉卵囊藻的生长，可作为波吉卵囊藻的遗传转化筛选试剂。　　(2)通过离心洗涤法有效的去除波吉卵囊藻中霉菌污染后，再采用溶菌酶预处理结合抗生素（400μg/mL氨苄青霉素、400μg/mL庆大霉素、400μg/mL卡那霉

关 键 词： 波吉卵囊藻 遗传转化体系 选择标记基因 电击法 转录组

领　　域： []