导　　师： 刘云岗

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 苯(Benzene)是一种常见环境污染物和人类致癌物，尤以引发再生障碍性贫血和白血病令人关注。既往研究表明苯的慢性（包括致癌）毒效应是通过其活性代谢物来起作用的，即CYP2E1酶催化的反应产物。然而，迄今尚无报道苯在人CYP2E1酶活化条件下诱发基因突变作用;此外，本课题组近年报道苯及其代谢产物对重组表达人CYP2E1和人磺基转移酶(sulfotransferase，SULT)1A1的V79细胞诱发微核形成，并且证明CYP2E1对苯、苯酚、氢醌、儿茶酚及三羟基苯均具有活化作用，而人SULT1A1则具有代谢减毒作用。本研究进一步探讨苯、上述羟化物及其终毒物1，4-苯醌诱发V79-hCYP2E1-hSULT1A1细胞Hprt基因突变的作用，并对活性氧(ROS)作为其一种影响基因致突变效应作用机制的可能性进行了研究。　　目的：1.以诱发基因突变作为观察终点，观察细胞内人CYP2E1酶对苯及其羟化代谢物苯酚、氢醌、儿茶酚、三羟基苯代谢活化作用。　　2.对苯、其一系列羟化代谢物或1，4-苯醌作用于细胞产生的ROS进行检测，以探讨氧化应激与代谢活化的关系及是否参与受试物的毒性作用。　　方法：细胞毒性采用CCK-8试验来观察，暴露/恢复时程为72h/0h或24h/48h;Hprt致突变试验采用上述处理方案，按标准实验程序进行;以DCFH-DA为荧光染料用流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species，ROS)含量。细胞毒性和ROS数据（均数±标准差，分别含6与4个重复样）用方差分析进行统计学推断;基因突变数据按计数资料（合并2个重复数据）采用确切概率法处理。　　结果：1.CCK-8试验结果提示6种受试物对V79-hCYP2E1-hSULT1A1和V79-Mz细胞均呈现一定的细胞毒性，同一化合物不同细胞之间无明显差异，细胞毒性强度呈现苯＜三羟基苯＜苯酚＜儿茶酚＜苯醌＜氢醌的次序;除苯以外其它化合物都表现出浓度依赖性细胞毒

关 键 词： 苯污染物 羟化代谢物 人体细胞 酶 致突变作用