导　　师： 孙力军;廖建萌

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广东海洋大学

摘　　要： 抗菌脂肽对多种病原微生物特别是真菌、细菌及支原体等有强烈的抗菌活性,在医药及生物防治等多个领域具有极大的应用潜力,但陆地来源有部分菌株存在脂肽产生能力弱及对特定病原菌株抗菌活性专一性薄弱等问题,一定程度上限制了脂肽产量发展,需要从新的微生物资源中筛选产脂肽能力强、抗菌针对性显著的脂肽产生菌株。红树林中的微生物类群所处耐盐、寡营养、厌氧、频繁的潮汐等特殊生活环境,造就了其微生物具有特殊的生理生化代谢途径及特殊的繁殖方式,按常规分离筛选方法难高效分离到产脂肽能力强的目标菌株;即使获得目标菌株,在不适合的发酵条件下其也会造成脂肽物质不易合成或不产。因此,本研究拟以红树林海域环境不同部位样本为筛选材料,利用溶血活性及表面活性结合脂肽合成酶基因PCR扩增进一步初步分离出有产脂肽的能力目标菌株,同时以TOF-MS深入研究产脂肽菌株发酵液中脂肽的组分。最后以LC-MS/MS和抑菌效果对目标分离菌株发酵发酵条件进行优化。为海洋源脂肽产生菌株的进一步应用奠定基础。1、本研究以红树林的树叶、树皮及海泥及其区域的海水作为样品分离出抗菌活性强及抗菌谱广的红树林源细菌菌株。以液体培养基筛选、抗菌谱测定及16SrDNA和系统发育树建立对分离目标菌株进行研究。结果表明,初筛选出40株海洋环境的细菌菌株,以点种法复筛发现仅有17株菌株有稳定的抗菌活性;在此基础下,发现在代谢活性物质抗菌效果中仅有6株菌株能在少数的培养基里合成抗菌物质,其中HY-5发酵上清液对26株供试菌株呈现出了抗菌谱广及活性强,可作为后续试验研究菌株。同时17株有抗菌活性菌株分别被为蜡样芽孢杆菌、假交替单胞菌、解淀粉芽孢杆菌、流河弧菌、短小芽孢杆菌、及弯曲芽孢杆菌等菌种。2、为快

关 键 词： 红树林 抗菌脂肽 扩增 发酵条件优化

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