导　　师： 张永亮

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 猪对氮营养素的利用效率受诸多因素的影响，日粮蛋白水平是影响猪的生长发育和养分利用效率的关键因素。肝脏是哺乳动物重要的代谢器官，日粮蛋白水平在肝脏氨基酸代谢、分泌性蛋白质合成、尿素循环、糖脂代谢、排毒等生化过程中发挥着重要作用，其中尿素循环是体内氮排放的主要形式，但其分子调控机制还不清楚。因此本研究利用高通量测序手段比较分析了低蛋白日粮与正常蛋白日粮断奶仔猪肝脏相关蛋白质和miRNAs表达规律，并对差异表达的蛋白和miRNAs进行相互作用的网络分析，以寻找与调控尿循环素代谢相关的关键miRNAs，为低蛋白日粮调控肝脏尿素循环的分子机制提供理论依据。　　试验一、试验选用18头28日龄断奶的杜×长×大三元杂交仔猪(初始体重：9.57±0.61kg)，随机分为3个处理组，处理组日粮的粗蛋白质(Crudeprotein，CP)水平分别为20%CP、17%CP和14%CP。饲养30d后采集血样和肝脏用于蛋白组学分析和后续相关指标检测。iTRAQ结果显示3个试验组肝脏中共获得6222个蛋白，17%CP与20%CP组相比共得到的差异蛋白172个;14%CP与20%CP组相比共得到差异蛋白235个。KEGG通路分析显示17%CP与20%CP组相比所得到的差异蛋白共富集到13条通路，14%CP与20%CP组富集的通路有15条，均主要是集中在与氨基酸代谢、糖脂代谢、维生素代谢、氧化应激、免疫、ECM等相关的代谢通路。结合iTRAQ分析、Western Blot验证及其它相关指标的检测结果发现，相比20%CP组，14%CP组显著抑制了肝脏蛋白质的生物合成，而17%CP促进了蛋白质的生物合成;低蛋白日粮（14%CP组和17%CP组）均显著抑制肝脏尿素合成，糖异生和脂肪氧化，促进了肝糖原和脂肪合成。　　试验二、为分析低蛋白日粮与正常日粮组间差异miRNAs表达规律，并筛选出与尿素循环相关miRNAs，本试验采用Solexa深度测序�

关 键 词： 低蛋白日粮 尿素合成 差异蛋白 猪 肝脏基因 氮营养素

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