导　　师： 杨礼香

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广州大学

摘　　要： 番杏(Tetragonia tetragonioides(Pall.)Kuntze)为番杏科番杏属一年生或二年生半蔓性草本植物,分布于亚热带及温带地区的滨海富盐区域,是一种具有经济价值和生态价值的盐生蔬菜。番杏作为一种高耐盐性的盐土植物(halophyte),可耐受海水盐度,可在海水倒灌引起的盐滞地区正常生长,常用于改良和利用滨海滩涂地、盐荒地和海水倒灌的农田,是一种具有重要生态价值的经济作物。本文以番杏为研究对象,从番杏的cDNA文库中随机测序获得基因TtASR(GenBank登录号:MH454101),并对其进行生物信息学分析和基因功能验证,研究结果如下:1.番杏TtASR的生物信息学分析:TtASR全长1112 bp,编码区长度为723 bp,编码243个氨基酸,蛋白质等电点为5.26,分子质量大小是25.29 KD。TtASR蛋白的N端富含甘氨酸;而其靠近C端含有ASR蛋白共有的ABA和水分胁迫结构域(ABA/WDS domain);在C末端含有一个核定位序列NLS(Nuclear localization signal),推测TtASR可能分布于细胞核。2.番杏TtASR的表达分析:TtASR在番杏植株内广泛表达;同时,高盐、高渗透压、ABA等胁迫条件均可以诱导TtASR基因的表达。3.TtASR蛋白在大肠杆菌中的异源表达功能验证:通过在大肠杆菌中诱导表达TtASR蛋白,可以提高大肠杆菌菌株耐盐、抗渗透压、抗氧化的能力。4.TtASR的酵母功能验证:TtASR基因能够提高野生型酿酒酵母菌WT303的耐盐性,以及提高氧化敏感型酿酒酵母菌株Δyap1、Δskn7菌株的抗氧化能力。5.TtASR转录活性检测:利用β-半乳糖苷酶法检测TtASR的转录活性,发现TtASR基因与一些ASR家族基因不一样,并不具有转录活性,推测与其N-terminal结构域相关。6.番杏TtASR的亚细胞定位分析实验结果表明:TtASR蛋白主要分布在细胞质与细胞核中。7.番杏TtASR在拟南芥中的转基因超表达验证:将TtASR构建到转基因超表达载体上,通过农杆菌侵染法转化到拟南芥中,经抗性筛选得�

关 键 词： 番杏 耐盐 耐旱 转基因

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