导　　师： 赵谋明

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： 弹性蛋白作为皮肤组成中重要的结构蛋白，在皮肤老化过程中由于弹性蛋白酶等基质金属蛋白酶含量的升高而被降解，导致皮肤失去弹性，因此，开发一种弹性蛋白酶抑制肽是抵御或延缓皮肤老化的有效方法，在抗皮肤老化功能性食品中具有非常广阔的应用前景。本文以牛动脉为主要原料，通过分析Alcalase?2.4L对牛弹性蛋白的酶解规律，优选弹性蛋白酶抑制活性较高的水解产物进行光损伤动物实验和成纤维细胞实验以验证其功效，并进一步从水解产物中分离、鉴定了4条具有高弹性蛋白酶抑制活性的肽段。在此基础上，探究了弹性蛋白酶抑制肽对光损伤成纤维细胞的保护作用机理，并对这些肽的消化吸收特性进行了研究。本文主要实验结果如下：　　(1)深入研究了Alcalase?2.4L对牛弹性蛋白的酶解规律，发现由于弹性蛋白结构稳定难以被深度酶解，其水解度和游离氨基酸含量都很低(最大值分别仅为2.16%和33.23μg/mL)。此外，由于弹性蛋白特殊的氨基酸组成，其水解产物含有较高水平的Gly、Ala、Val、Pro、Leu，这些氨基酸在弹性蛋白水解产物中对于抑制弹性蛋白酶具有重要作用。通过利用二维液相色谱进一步分析弹性蛋白水解产物的指纹图谱发现大分子量/极性较小的肽随酶解时间的增加被深度水解成分子量较小和/或较强极性的肽，且酶解10h后样品指纹图谱趋于一致，结合质谱分析、鉴定了405个多肽，发现大多数肽段来自弹性蛋白中含有丰富的疏水重复单元的疏水结构域，而弹性蛋白的C末端区域中很少有蛋白片段被释放。　　(2)摄入弹性蛋白水解产物(Elastin hydrolysates, EH)的小鼠其皮肤含水量及羟脯氨酸含量明显增加，表皮增生和皮脂腺增生症状明显改善，表明EH可以有效保护皮肤免受紫外损伤。成纤维细胞实验结果进一步表明，EH可有助�

关 键 词： 弹性蛋白肽 抗皮肤光老化 弹性蛋白酶抑制活性 成纤维细胞 消化吸收

领　　域： [] []