导　　师： 刘超

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 研究背景:当一个刑事案件或治安案件发生时,在法医物证检验中常染色体STR和Y染色体STR通常是分开两次检验的。然而,现有的STR分型技术因受到物证检材的状态、STR基因座复合扩增的个数、扩增体系耐受能力的大小等因素的影响,常染色体和Y染色体分开检验的常规方式因为对检测时间、模板状态等因素的硬性要求导致不能快速高效全面的提供DNA线索,从而可能导致失去有效侦查的最佳机会。此外,复杂的犯罪现场环境如高温、潮湿、微生物等因素可导致收集的现场物证常出现DNA降解、多个个体DNA混合、DNA极其微量等情况,使得常规检验不能获得良好的分型结果。现有的检测体系已无法满足日益增加的刑事案件对于法医DNA快速现场检验的要求,因此研发同时检测常染色体STR和Y染色体STR的复合扩增体系,是目前法医DNA检案的一种迫切需求。目的:构建18个常染色体STR、14个Y-STR和性别鉴定Amelogenin等33个基因座的荧光复合扩增体系,并对该体系进行系统效能验证和法医学参数评估,以期为法医物证检验提供一种更高通量、更稳定可靠的STR复合扩增和检测系统,从而满足公安系统实际检案中对于微量DNA、降解DNA、混合DNA等疑难检材的检测需求。方法:本研究利用高效的热启动Taq DNA聚合酶、多重复合扩增及六色荧光检测技术,在18个常染色体STR和1个性别鉴定基因座Amelogenin的基础上,加入14个Y-STR基因座,引入mini-STR引物设计,优化复合扩增反应体系和PCR反应程序,构建了 33个基因座的荧光复合扩增体系,并对该体系进行系统效能验证和法医学应用价值评估。结果与结论:本研究成功构建了 33个基因座的荧光复合扩增体系。该体系包含有13个mini-STR,灵敏度高,特异性好,重复性高,分型准确。该体系在广东汉族、广西壮族、广西瑶族和广西仡佬族四个群体中的累计匹配概�

关 键 词： 复合扩增 遗传多态性 法医物证

领　　域： []