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几种超小分子有害物特异性抗体制备及免疫检测技术研究与应用

导  师: 孙远明

授予学位: 博士

作  者: ;

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 近年来,由食品中化学有害物引发的食品安全问题尤为严重。加强食品安全检测已成为控制污染食品进入市场、保障消费者安全的重要手段之一。当前,食品中化学有害物的检测主要以基于色谱技术及色谱与质谱联用技术的仪器检测方法为主。仪器法检测虽然准确、可靠,但是需要昂贵的设备、专业的操作人员及复杂的样品前处理、检测成本很高,无法满足大批量样品现场检测的需求。以抗原-抗体特异性反应为基础的免疫检测技术具有分析时间短、操作便捷、灵敏高、特异性好、通量高、检测成本低等优势,十分符合我国农产品及食品生产经营分散、量大面广的特点。然而,大量试验结果表明:当化合物的相对分子质量<300 Da时,想要获得其特异性的高亲和力抗体难度逐渐增大;而当半抗原分子量<150 Da(在本论文中定义为“超小分子半抗原”)时,即使偶联到载体蛋白上也难以有效引起动物免疫应答,因而其高亲和力抗体几乎无法获得,至今对其进行直接免疫检测未能突破。然而与此同时,食品中存在着许多“超小分子化学有害物”,比如在食品加工过程中自发产生的内源性有害物丙烯酰胺、氯丙醇、氨基甲酸乙酯、组胺等。这些超小分子化合物一般都具有潜在的毒性、致癌性或致畸性,给人们的身体健康构成极大威胁。因此,突破“抗‘超小分子化合物’的高亲和力抗体制备困难”的技术瓶颈,建立其快速免疫分析方法并进行筛查应用具有重要的理论和现实意义。  本论文以食品加工中产生的三种典型的超小分子化学污染物组胺、氨基甲酸乙酯与丙烯酰胺为研究对象,通过大量设计半抗原及动物免疫制备其特异性抗体,分析半抗原与抗体之间的构效关系,并在获得特异性抗体的基础上建立相应的快速免疫分析方法,在实�

关 键 词: 组胺 氨基甲酸乙酯 丙烯酰胺 免疫检测 超小分子有害物 食品安全

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