导　　师： 欧仕益

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 暨南大学

摘　　要： 5-羟甲基糠醛（5-Hydroxymethylfurfural,HMF）是加工食品中含量较高的内源性污染物,L-半胱氨酸（L-cysteine,L-Cys）是所有氨基酸中对HMF消除能力最高的条件必需氨基酸。课题前期研究发现,在热加工条件下,L-Cys可与HMF形成4种加合产物。本研究发现,HMF在胃环境条件下较易与L-Cys反应,经鉴定,主要产物为缩硫醛（DCH）。在此基础上,我们制备出了高纯度的DCH,采用人小肠细胞Caco-2模型对DCH进行毒性评价。主要结论如下:1.DCH的制备条件优化与结构鉴定在以下条件下制备了加合物缩硫醛:HMF与L-Cys浓度比1:8、反应温度90℃、时间9 h、pH 3。采用HP-20型大孔树脂和反相硅胶分离获得99%以上纯度的化合物,经HPLC-MS/MS和NMR鉴定,确定该化合物为DCH:它是由HMF的醛基与两个L-Cys的巯基经脱水缩合形成的缩硫醛,分子式为C12H18N2O6S2,相对分子质量为350.40。2.模拟消化体系中DCH的形成与变化DCH可以在体外消化过程中形成并稳定存在于消化液中,其中,胃消化环境利于DCH的生成,而肠消化环境促进HMF消减但形成其他产物;在模拟胃消化后期,当HMF含量不再下降时,DCH含量仍持续升高,此时新产生的DCH可能来源于其他HMF衍生物的转化。3.DCH在Caco-2细胞中的毒性与吸收转化（1）采用HMF和DCH培养Caco-2细胞72 h,发现DCH的毒性低于HMF,两者的IC50值分别为14.95 mM和31.26 m M。HMF和DCH的增殖抑制作用是通过干扰细胞周期进程实现的;但作用方式不同:HMF诱导细胞凋亡,DCH阻滞细胞周期;（2）Caco-2细胞对HMF的吸收率高于DCH:处理浓度为0.2 mM时,HMF、DCH的吸收率分别为40.0%、17.05%;处理浓度为2 mM时,HMF、DCH的吸收率分别为36.5%、4.51%。被吸收的HMF与DCH大部分被代谢转化,其中DCH释放了部分HMF,增大了HMF在肠道的暴露风险。更多还原

关 键 词： [3738480]羟甲基糠醛 [2573274]体外消化 [5793181]加合物 [8240062]CACO-2细胞 [435561]毒性评价

分 类 号： [TS201.6]

领　　域： []