导　　师： 张刚庆

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的现已有大量的研究证明了长链非编码RNA(lncRNA)对恶性肿瘤发生发展的调控作用。据研究报道长链非编码RNA linc-UBC1可通过结合PRC2而影响膀胱癌预后。本研究拟通过检测linc-UBC1在结直肠癌(CRC)中的表达,探索linc-UBC1对CRC细胞生物学功能的影响,初步揭示linc-UBC1对CRC的作用,为今后CRC的诊断和治疗提供新的思路。方法1.收集96例结直肠癌患者的手术标本(包含癌组织和对应癌旁组织)和患者的临床病理资料,结直肠癌细胞系(SW480、SW620、HCT116和HT29)以及正常结肠上皮细胞NCM460由南方医科大学捐赠。2.通过实时荧光定量聚合酶链反应技术(RT-qPCR)检测结直肠癌组织和对应癌旁组织linc-UBC1的表达量,并分析其与临床病理资料的关系,采用Kaplan—Meier法分析linc-UBC1与生存资料的关系。3.通过RT-qPCR检测4种结直肠癌细胞系及正常结肠上皮细胞NCM460中linc-UBC1的表达量,选取linc-UBC1表达量最高的结直肠癌细胞系SW620,通过脂质体转染技术干扰SW620细胞系中的linc-UBC1基因,并使用RT-qPCR检测其干扰效率。4.运用CCK8、流式细胞术及Transwell实验检测linc-UBC1基因干扰后的SW620细胞系的增殖能力、凋亡率及周期、迁移及侵袭能力的变化。5.运用western blot实验检测linc-UBC1基因干扰后的SW620细胞系的凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3、cleaved caspase-9 和 Bcl-2)表达量的变化。结果1.linc-UBC1在结直肠癌组织中的相对表达量为6.55±6.60,远高于癌旁组织的相对表达量1.67±1.54,两者比较差异有统计学意义(t=8.32,P<0.001)。2.通过分析linc-UBC1的表达量与临床病理的关系得出:linc-UBC1的表达量与结直肠癌的TNM分期、肿瘤的大小、浸润的深度及淋巴结转移相关;差异有统计学意义(P<0.05)。而与患者的性别、年龄、肿瘤的分化程度、肿瘤位置和远处转移无关(P>0.05)。生存分析结果显示:linc-UBC1高表达组的生存时间明显小于linc-UBC1低表达组,差异有统计学意义(P<0.01)。多因素COX回归分析表明:linc-UBC1的表达水平可作为CRC患者的独立预后因子(Hazard ratio:2.434,95%CI:1.093-5.420,P=0.029)。3.与 NCM460 相比,SW620、HCT116 和 HT29 中 linc-UBC1 表达水平均明显升高(P<0.01),而在SW480细胞中无显著差异(P>0.05),其中SW620的linc-UBC1表达量最高。4.与阴性对照组相比,linc-UBC1干扰组的SW620的增殖、迁移及侵袭能力降低,凋亡率升高及周期受到抑制(P<0.05)。5.与阴性对照组相比,linc-UBC1干扰组的SW620的凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleavedcaspase-9的表达量显著上升,Bcl-2的表达量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论linc-UBC1在CRC组织中的表达量显著升高,且linc-UBC1的表达量与CRC的TNM分期、肿瘤的大小、浸润的深度、淋巴结转移及不良预后正相关,并且linc-UBC1可以促进CRC细胞的增殖、迁移及侵袭。因此,linc-UBC1有可能成为判断CRC患者预后和发展的新的肿瘤标记物。更多还原

关 键 词： [8965273]长链非编码RNA linc-UBC1 [4919540]结直肠癌 [1221536]预后 [5628795]基因功能

分 类 号： [R735.3]

领　　域： []