导　　师： 余让才

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 非洲菊（Gerbera jamesonii Bolus）是菊科多年生草本植物,是备受人们喜爱的世界十大鲜切花之一。本研究以自主杂交培育的金黄色‘金香’非洲菊品种材料,通过外源赤霉素（GA3）和其抑制剂（PAC）处理测定花色和类胡萝卜素的含量变化,进一步采用实时荧光定量PCR、hi TAIL-PCR、酵母单杂交、双荧光素酶、VIGS等技术,研究了MYB对‘金香’非洲菊舌状花中类胡萝卜素的合成调控以及其类胡萝卜素代谢对GA3的响应,为探索花色形成的调控网络奠定基础。主要结果如下:1、GA3处理后,‘金香’非洲菊舌状花颜色由金黄色变橙黄色,盛开期类胡萝卜素含量比对照提高74.1%。类胡萝卜素合成途径上的关键基因Gh PSY在GA3处理后其表达量同对照相比增加了53.1%;Gh LYCB在GA3处理后相对表达量增多,而Gh LYCE变化不大。2、GA3和PAC处理后,转录因子Gh MYB1、Gh MYB2、Gh MYB3、Gh MYB6、Gh MYB7和Gh MYB8与Gh PSY表达量变化相一致。另外,Gh MYB1、Gh MYB2、Gh MYB3、Gh MYB7和Gh MYB8与Gh PSY在不同花发育时期的表达规律相一致。3、利用RT-PCR技术,从‘金香’非洲菊的舌状花中克隆了8个R2R3-MYB转录因子的c DNA全长序列,分别为Gh MYB1、Gh MYB2、Gh MYB3、Gh MYB4、Gh MYB5、Gh MYB6、Gh MYB7和Gh MYB8,其c DNA的ORF长分别为1093 bp、521 bp、534 bp、1125 bp、1331 bp、540 bp、669 bp和744 bp,分别编码364、174、180、375、443、180、222和247个氨基酸。通过氨基酸序列分析表明,Gh MYB3、Gh MYB7、Gh MYB8均属于R2R3型转录因子。三个MYB转录因子的蛋白二级结构预测发现这三者的二级结构布局有着一定的相似性,有可能表明其形式功能也具有相似性。4、利用hi TAIL-PCR技术克隆出Gh PSY 5’端的上游启动子序列。酵母单杂交的结果分析表明:Gh PSY启动子可与Gh MYB3、Gh MYB7、Gh MYB8在酵母体中相结合。通过双荧光素酶实验结果再次表明Gh PSY启动子可与Gh MYB3、Gh MY

关 键 词： 赤霉素 调控 非洲 菊花瓣 类胡萝卜素

领　　域： [] []