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鸡传染性支气管炎病毒和H9N2亚型禽流感病毒共感染协同致病性研究

导  师: 任涛

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)引起的急性、高度传染性的呼吸道传染病;H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)是家禽中流行较广的低致病性病原,两种病原均广泛存在于鸡群中,均可通过呼吸道传播,这为两种病原发生混合感染协同致病提供可能。关于IBV和H9N2亚型AIV混合感染的研究已有报道,但现有研究未能清楚解释IBV与H9N2亚型AIV在感染过程中相互作用的关系及其协同致病机制。因此,本研究旨在通过两种病毒同时和先后顺序共感染SPF鸡、SPF鸡胚,探索IBV和H9N2亚型AIV不同时间顺序共感染与协同致病力之间的关系,并分析协同致病机制。主要研究内容如下:1.参照Gen Bank上公布的已有毒株序列设计IBV-N和H9N2-M基因q PCR引物,并参照文献中的引物对IBV-N和H9N2亚型AIV-M基因进行RT-PCR扩增,将扩增产物连接到p MD19-T载体上,获取标准质粒,通过q PCR方法成功地建立IBV-N和H9N2-M标准曲线,从而建立IBV和H9N2实验毒株绝对定量的检测方法。2.105只SPF鸡,随机分成6组,IBV-H9N2亚型AIV顺序感染组(I-H),H9N2亚型AIV-IBV顺序感染组(H-I),IBV+H9N2亚型AIV同时感染组(I+H),IBV感染组,H9N2亚型AIV感染组(各19只)和对照组(10只),攻毒后进行动物临床症状和病理变化观察,利用RT-q PCR分别检测IBV和H9N2亚型AIV在各组动物的组织分布情况、排毒情况,对攻毒14 d后动物免疫器官指数和HI抗体滴度进行分析。结果表明I-H攻毒组发病率为70%,死亡率为20%,均高于其他各组,I-H组和I+H组鸡排毒水平和脏器病毒载量高于其余组;I-H组和I+H组的免疫器官(胸腺和法氏囊)指数在攻毒14 d后显著低于IBV和H9N2亚型AIV单独感染组;I-H组和I+H组血清中H9N2的HI抗体滴度在攻毒14 d后显著低于H-I组;I-H组和I+H组病理损伤更严重;综上所述,先感染IBV,后感染H9N2�

关 键 词: 鸡传染性支气管炎病毒 亚型 禽流感病毒 共感染 协同

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