导　　师： 王嫣;卢琳琳

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广州中医药大学

摘　　要： 目的:肺癌(lung cancer)是当今世界发病率排名最高的恶性肿瘤,同时也是死亡率最高的肿瘤,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)发病率占比80%,其中67%的非小细胞肺癌经检测为YAP高表达,针对非小细胞肺癌病例的研究发现,YAP的表达高低直接与肺癌TNM分期相关,同时也与肺癌的淋巴结转移有显著相关性。中药酸枣仁具有抗惊厥作用,中医常用于治疗失眠。近年来流行病学研究发现酸枣仁中的皂苷具有一定的抗肿瘤作用,并且罕有副作用报道。酸枣仁皂苷A来源于中药酸枣仁,是酸枣仁中主要的皂苷成分,体外研究表明,酸枣仁皂苷A可以引起肺癌细胞的衰老、凋亡以及增殖抑制,但是不影响正常细胞。进一步研究表明,酸枣仁皂苷A的抗肿瘤作用主要是来源于HIPPO通路的激活,从而导致其下游靶点蛋白YAP入核减少。而该通路的激活,是基于酸枣仁皂苷A直接作用于细胞膜表面的Fat4蛋白,激活Fat4蛋白。然而,尚未有文献报道过酸枣仁皂苷A针对肺癌的治疗作用及机制,而Fat4蛋白也尚未报道存在激活剂。基于研究现状,本文还采用了乌拉坦诱导肺癌小鼠的模型来评价酸枣仁皂苷A对于肺癌的化学预防作用,并在体外实验中阐明了其预防肺癌相关机制以及通路。方法:1.考察酸枣仁皂苷A对NSCLC的活力以及检测YAP表达的影响采用商业化的NSCLC细胞系A549、H1299和H1975细胞和人胚肺成纤维细胞MRC-5作为体外研究模型,经不同浓度酸枣仁皂苷A(0-500 μM)给药2-5天后,以MTT法检测酸枣仁皂苷A对细胞系活力抑制作用作用并确定酸枣仁皂苷A给药浓度与给药时间。并通过实时定量PCR(Real-time PCR)以及Western blot检测YAP表达水平。2.酸枣仁皂苷A对A549肺癌细胞YAP蛋白表达以及HIPPO通路的调控研究基于MTT实验,确定体外实验给药浓度,利用Western blot检测酸枣仁皂苷A对肺癌细胞YAP上游的HIPPO通路蛋白,并

关 键 词： 酸枣仁皂苷 非小细胞肺癌 化学预防 通路 蛋白 蛋白

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