导　　师： 邓音乐

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 青枯劳尔氏菌（Ralstoniasolanacearum）侵染寄主植株的维管束，导致青枯病的发生，进而造成植株的死亡，俗称“植物瘟病”，是全球热带和亚热带地区的重要植物病害，青枯菌可以侵染54个科的数百种植物。到目前为止还没有一种能够有效防治青枯病的农业措施、物理措施或者化学措施，因此生物防治日益受到人们的重视。本研究分为三个部分：1、青枯菌GMI1000菌株的eGFP标记;2、青枯拮抗菌的筛选鉴定和温室接种实验;3、拮抗菌GZ-34活性物质的提取分离鉴定和发酵条件优化，拮抗菌GZ-34对黑粉菌和稻瘟菌的抑制作用。　　主要研究结果如下：　　1、构建PBBR1-2-eGFP质粒，转入青枯菌，获得eGFP标记的青枯菌菌株。　　2、从广东广州、河南永城、湖南永州等30地共采集土样30份，采用土壤稀释悬浮液分离法，涂布LB平板，挑取单菌落，在青枯菌平板上通过对峙生长筛选得到384株有明显拮抗效果的菌株，然后对初筛的拮抗菌摇菌发酵进行复筛，得到有稳定拮抗效果的菌株56株。　　3、对筛选得到的拮抗菌菌株进行鉴定，结果为：菌株GZ-27为单不动杆菌（Acinetobactersoli），保藏编号为CCTCCNO：M2016351;菌株GZ-33为泛菌（Pantoeacoffeiphila），保藏编号为CCTCCNO:M2016352;菌株GZ-34为大肠埃希氏菌（Escherichiacoli），保藏编号为CCTCCNO:M2016353;菌株GZ-39为达旦提狄克氏菌(Dickeyadadantii)，保藏编号为CCTCCNO:M2016354，以上菌株都保藏于位于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心。　　4、对菌株GZ-27，33，34，39进行温室接种番茄苗实验，采用灌根法接种，以上4种拮抗菌均有良好的防治效果。　　5、对拮抗菌菌株GZ-34的抑菌物质进行提取分离纯化和鉴定。经过发酵萃取得到粗提液，检测其抑菌活性。结果显示，粗提物对青枯菌有很高的抑菌活性，同时粗提物能抑制甘蔗

关 键 词： 青枯菌 拮抗菌 大肠埃希氏菌 生物防治

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