导　　师： 刘文生

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 本研究对乌龟生长激素受体基因（Growth hormone receptor, GHR）cDNA进行克隆测序，分析GHR和类胰岛素生长因子（Insuline-like growth factors, IGF-I）在组织中的差异性表达。观察在饥饿状态下，乌龟各组织G HR和IG F-I的表达量以及肝脏中G HR和IG F-I的表达量随着再投喂发生的变化，为研究乌龟在饥饿胁迫下生长轴相关基因调控机制提供理论依据。　　1. GHR cDNA的分子特征　　根据亲缘关系较近物种的G HR的保守区域设计引物，通过克隆测序拼接后获得cDNA全长序列，共3936 bp，包括5′UTR219 bp，3′UTR1870 bp，开放阅读框1848 bp，共编码615个氨基酸，蛋白质分子量为68.97 KD，等电点（pI）为4.38，疏水性氨基酸占37.88%，极性不带电和氨基酸占31.59%，酸性氨基酸占13.05%，碱性氨基酸占17.44%。氨基酸序列中含量最高的为天冬氨酸（Asp），占9.01%，次之为亮氨酸（Leu），占8.86%，最低的是甘氨酸（Gly），占1.82%。　　2. GHR和IGF-I的差异性表达　　采用实时荧光定量PCR技术对GHR mRN A的差异性表达进行检测分析，结果表明：G HR mRN A在脑、心脏、肺、肌肉、肝脏、脾、肾、膀胱、胃、前肠、中肠、后肠、性腺和脂肪共14种组织中均有表达，在肝脏中表达量最高，在性腺中表达量最低。IG F-I mRN A在各组织中都有表达，在肝脏中表达量最高，在消化道中表达量较高，在性腺中表达量极低。　　3.饥饿处理后GHR和IGF-I的差异性表达　　饥饿28天，肺、肝脏、膀胱、胃、前肠、后肠、精巢和脂肪组织中GHR mRNA的表达量出现下调，特别在肝脏组织中GHR mRNA表达量显著下降（P＜0.05）。在脑、心脏、肌肉、脾、肾和中肠中有上调作用，其中心脏和肌肉中G HR mRN A表达量上升显著（P＜0.05）。　　饥饿28天，大部分组织中IGF-I mRNA表达量出现下调现象，肝脏组织中IGF-I mRNA表达量显著下降（P＜0.

关 键 词： 乌龟生长激素 受体基因 克隆测序 表达 饥饿状态 克隆

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