导　　师： 王瑞华

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的：　　肿瘤干细胞是肿瘤中的特殊细胞亚群，具有自我更新能力及多向潜能性，可能从肿瘤细胞去分化重编程而来，是肿瘤临床治疗失败的重要原因。脱氧胆酸(DCA)是胃食管反流内容物的成分之一，在诱导食管鳞状上皮细胞转变成Barrett食管中起重要作用。Barrett食管是食管腺癌的癌前病变，考虑到食管腺癌生长在脱氧胆酸刺激的炎症环境下，本实验预探讨脱氧胆酸是否能影响重编程因子KLF4、OCT4、Nanog的表达，对食管腺癌细胞有食管腺癌干细胞转化的恶性诱导作用，且常见的IL-6/STAT3炎症信号通路是否参与该过程的调节。　　方法：　　1、使用浓度为250uM的DCA分别刺激食管腺癌OE33细胞株0h、3h、6h、12h，通过RT-PCR检测重编程因子KLF4、OCT4、Nanog、细胞因子IL-6、凋亡蛋白Bcl-xL的mRNA表达水平;采用ELISA检测细胞培养基上清液中IL-6蛋白水平;使用Western Blot检测STAT3、pSTAT3、KLF4、OCT4蛋白表达状况。　　2、运用小干扰RNA沉默STAT3，使用RT-PCR和Western Blot法检测KLF4、OCT4、Bcl-xL的mRNA和蛋白表达变化，探讨STAT3和KLF4、OCT4、Bcl-xL的上下游调控关系。　　3、使用重组人IL-6(rhIL-6)刺激食管腺癌OE33细胞株24h，通过RT-PCR和Western Blot法检测pSTAT3、KLF4、OCT4、Bcl-xL的mRNA和蛋白表达变化，进一步明确IL-6/STAT3信号通路的参与调控作用。　　结果：　　1、DCA刺激食管腺癌细胞，相较于刺激0h，细胞重编程因子KLF4在DCA刺激3h、6h、12h后，mRNA相对表达量分别是1.87、6.34(P＜0.01)、4.57(P＜0.05)倍，DCA刺激0h、3h、6h、12h的KLF4蛋白相对表达量分别为0.78、0.89、1.79(P＜0.05)、2.73（P＜0.05）;OCT4在DCA刺激3h、6h、12h后基因mRNA相对表达量上升达1.43、1.87（P＜0.05）、4.51（P＜0.01）倍，刺激0h、3h、6h、12h的OCT4蛋白相对表达量为0.53、0.70、1.87(P＜0.05)、2.36(P＜0.05);Nanog在DCA刺激3h、6h、12h后mRNA相

关 键 词： 食管腺癌 脱氧胆酸 癌细胞重编程因子 肿瘤干细胞转化 调控机制

领　　域： []