导　　师： 陈彦涛

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 深圳大学

摘　　要： 环境激素是一类外因性干扰生物体内分泌的化学物质,具有毒性大、稳定存在、难以降解等特点。寻找绿色、环保、高效去除环境激素的方法成了迫在眉睫的任务。辣根过氧化物酶(HRP)能够高效催化过氧化氢去除环境雌激素。但HRP稳定性差、底物耐受性低、pH适应范围窄等问题,限制了HRP在去除环境雌激素中的应用。分子包埋法是通过蛋白质表面的基团与修饰剂反应,再通过聚合法或吸附法对单个蛋白分子进行包埋,使蛋白质的活性和稳定性得到提高。本文利用分子包埋法,对辣根过氧化物酶进行化学修饰,进而引发自由基共聚,制备了含有HRP的纳米凝胶;进而探讨了纳米凝胶酶对环境雌激素去除的效果;最后研究碳二亚胺/N-羟基硫代琥珀酰亚胺钠盐(EDC/Sulfo-NHS)法对纳米凝胶酶稳定性的影响。本研究首先在辣根过氧化物酶表面进行分子修饰,引入双键的共聚单体。通过原位自由基聚合法将两性离子单体共聚在蛋白酶表面,形成纳米凝胶酶。其纳米粒径尺寸分布在20-100 nm,Zeta电位为-1.8 m V。经过分子包埋,其热稳定性也得到了明显增强,在50℃下,水浴180 min,其活性仍保持48%,而HRP的活性只有8%。通过米氏常数测定可得,分子包埋法基本不会改变辣根过氧化物酶对底物的亲和力。其次,本文尝试使用纳米凝胶酶对环境雌激素进行去除研究。选择苯酚、双酚A、4-氯苯酚、2,4-二氯苯酚和4-甲氧基苯酚为去除对象。在探讨HO对纳米凝胶酶催化氧化苯酚的影响实验中,HO最适浓度为1 mM。在探讨pH对纳米凝胶酶催化氧化苯酚的影响实验中,在pH 3.0到10.0之间有较好的催化活性,最适pH为9.6。在探讨纳米凝胶酶催化氧化酚类环境激素实验中,纳米凝胶酶与辣根过氧化物酶相比,对苯酚去除率提高了61.9%,对双酚去除率提高了33.2%,对4-氯苯酚去除率提高了29.8%,对2,4-二氯苯酚去除率提高�

关 键 词： 辣根过氧化物酶 分子包埋 环境激素 酚类化合物

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