导　　师： 何援利

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的：　　近年来研究表明，早发性卵巢功能不全(POI)与自身免疫失调有关，表现为外周血调节性T细胞(Treg)降低。不同来源的间充质干细胞(MSCs)应用于化疗性POI动物模型时，均显示有改善诱导POI的作用，但应用于免疫诱导的POI的研究甚少。也有研究显示雌激素(17β-E2)有促进Treg增殖并增强其免疫抑制活性的作用。本实验探讨了脂肪间充质干细胞(ADSCs)联合17β-E2对POI患者Treg的免疫调控作用。　　方法：　　第一章：原代培养ADSCs并进行流式鉴定及成脂成骨诱导。密度梯度离心法分离健康人及POI患者的PBMCs。在植物凝集素(PHA)的刺激下，将PBMCs分别与不同浓度ADSCs及17β-E2共培养72h，检测淋巴细胞增殖率和Foxp3、TGF-β1、IFN-γ的mRNA水平以及Treg的比例。　　第二章：选择第一章中促Treg增殖效果最佳的1×105ADSCs以及10-9mol/L17β-E2作为联合组，在PHA的刺激下将PBMCs分别与对照组、10-9mol/L17β-E2组、1×105ADSCs组、联合组共培养72h，检测Foxp3、TGF-β1、IFN-γ的mRNA水平以及Treg的比例。　　结果：　　第一章：原代培养的ADSCs纯度高，活性好，表型稳定，高表达CD29、CD44、CD105，低表达CD34、CD45、人白细胞DR抗原(HLA-DR)，具备成脂成骨分化能力。与对照组相比，不同浓度的ADSCs及17β-E2均能促进Treg的增殖，上调Foxp3、TGF-β1的表达，下调IFN-γ的表达。　　第二章：与对照组相比，各实验组均能上调Foxp3、TGF-β1的mRNA水平，下调IFN-γ的mRNA水平，及促进Treg表达，其中联合组的效果最佳。　　结论：　　第一章：ADSCs及17β-E2均能发挥免疫调节作用，诱导调节性T细胞生成，其中1×105ADSCs和10-9mol/L17β-E2为最佳浓度。　　第二章：ADSCs及雌激素可以通过促进Foxp3的表达、TGF-β1的分泌及抑制IFN-γ的分泌促进Treg增殖。ADSCs联合17β-E2能发挥协同作用，共同诱导Treg的免疫调节功能。

关 键 词： 卵巢功能不全 脂肪间充质干细胞 雌激素 细胞 免疫调控

领　　域： []