导　　师： 谢卫兵

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的:　　本研究拟通过建立甲基苯丙胺诱导主动脉瘤及主动脉夹层发生的动物模型及甲基苯丙胺中毒的细胞模型，运用组织学染色技术，初步探索甲基苯丙胺诱导主动脉瘤及主动脉夹层发生的动物模型;通过蛋白质免疫印迹、免疫组织化学染色、免疫荧光染色等技术，检测细胞外基质金属蛋白酶(MMP2、MMP9)、凋亡的maker基因(Caspase-3和PARP)、炎症的maker基因IL-1β的表达水平，初步探讨甲基苯丙胺诱导主动脉瘤及主动脉夹层发生的可能病理机制。通过siRNA干扰技术、免疫荧光染色、蛋白免疫印迹、VG和HE染色等技术，在动物模型及细胞模型上检测C/EBPβ及TGFβ通路的相关因子，探讨甲基苯丙胺诱导主动脉瘤及主动脉夹层发生的分子机制。并通过蛋白免疫印迹、免疫荧光染色在人体标本上对C/EBPβ等因子进行验证。为进一步研究甲基苯丙胺在主动脉瘤及主动脉夹层发生的作用及机制奠定了良好的基础。　　方法:　　第一部分:甲基苯丙胺诱导的主动脉瘤及主动脉夹层动物模型的建立　　1、甲基苯丙胺与3-氨基丙腈富马酸盐(β-aminopropionitrile monofumarate，BAPN)给药时间及给药浓度的确定　　2、通过HE染色、VG染色检测动物模型，统计成瘤率　　3、通过分子生物学技术探究甲基苯丙胺在其诱导的主动脉瘤及主动脉夹层模型中的作用　　第二部分:C/EBPβ在甲基苯丙胺诱导的主动脉瘤及主动脉夹层的作用　　1、血管平滑肌细胞甲基苯丙胺中毒模型的建立及动物模型的检测　　2、C/EBPβ在METH中毒细胞模型中的作用　　(1)取METH中毒细胞模型蛋白，通过Western Blot检测MMP2、MMP9，Caspase-3、PARP，IL-1β的表达水平。　　(2)设计针对大鼠血管平滑肌的C/EBPβsiRNA干扰片段，使用lipo3000脂质体转染血管平滑肌细胞，Western Blot检测C/EBPβ的表达情况，检验干扰序列的干扰效率�

关 键 词： 主动脉瘤 主动脉夹层 病理机制 甲基苯丙胺 增强子结合蛋白