导　　师： 曾其毅

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的：脓毒症是宿主对感染的反应失调而出现危及生命的器官功能障碍的临床综合征，脓毒症中重要器官的损伤是其致死的主要原因，尤其是肝脏。然而，脓毒症性肝损伤的致病机制迄今尚未阐明，临床疗效亦不理想。既往研究表明，生长分化因子-15(GDF-15)作为一种新的转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员，其功能涉及到免疫抑制、抗凋亡和抗炎等方面。GDF-15在发生心、肝、肾功能衰竭患者中明显增高，且GDF-15过表达可保护肾脏和心脏免受LPS诱导的器官损伤。那么GDF-15是否在脓毒症性肝损伤中发挥作用，其作用机制究竟如何仍待进一步探讨。本研究中，拟通过LPS和D-GalN诱导小鼠脓毒症性肝损伤建立动物模型，从而探讨GDF-15是否在内毒素性肝损伤中发挥作用以及其内在作用机制。　　方法：通过对小鼠腹腔内注LPS和D-GalN诱导急性肝损伤模型。采用全自动生化分析仪检测肝功能指标，HE染色观察小鼠肝脏组织形态学改变，ELISA法检测血清和肝组织中促炎症因子的水平，硫代巴比妥酸法和四甲基联苯胺法检测肝组织中氧化损伤标志物MDA和MPO水平，从而来分析GDF-15在内毒素性肝损伤中的作用。进一步对GDF-15作用机制的研究中，采用免疫荧光染色法和流式细胞术检测小鼠肝组织和枯否细胞中iNOS阳性细胞比率，荧光定量PCR法检测枯否细胞中iNOS mRNA的表达;ELISA法检测小鼠肝组织和枯否细胞培养上清中COX-2和MCP-1的表达;免疫蛋白印迹法检测NF-kB信号通路分子的表达。　　结果：LPS/D-GalN诱导的小鼠表现出明显肝细胞损伤和炎症细胞在肝组织中的浸润，肝组织中MDA、MPO和促炎症因子（IL-6、TNF-α和IL-1β）的水平明显升高，血清中肝功能指标ALT/AST和促炎症因子水平明显升高;而GDF-15可以显著减轻LPS/D-GalN的肝损伤作用和促炎症因子水平。进一步研究中，GDF-1

关 键 词： 脓毒症性肝损伤 致病机制 生长分化因子 促炎性肝巨噬细胞 细胞转化生长因子激酶 磷酸化水平

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