导　　师： 魏文康;古飞霞

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 仲恺农业工程学院

摘　　要： 犬、猫细小病毒分别被认为危害犬和猫最为严重的病毒之一。分别引起较高的死亡率,用药物防治的治愈率很低。当前在我国使用细小病毒与其它病毒联合的多联苗进行免疫,经常出现免疫失败,可能原因是区域不同、病毒变异等。犬猫细小病毒同属细小病毒属,两种病的发病年龄,临床症状也较为相似。鉴此,本研究通过在广东分离鉴定犬、猫细小病毒流行株,为进一步病毒的研究提供基础,并对分离到FPV和CPV毒株的NS1和VP2进行遗传变异分析,分析两者相似性,为监测FPV和CPV的变异状况和流行趋势提供了依据,为犬猫细小病毒通用核酸疫苗研制奠定基础。本研究通过犬猫细小病毒抗原快速检测试纸,PCR方法对来自广州某动物医院疑似CPV,FP V感染的犬猫粪便样品进行检测,结果检出4份CPV阳性,6份FP V阳性;过滤阳性粪便浸出液,接毒到CRFK细胞分离,观察到感染不同株病毒的CRFK细胞在不同时间出现拉丝、萎缩、变圆、脱落等病变。根据GenBank上收录的不同株犬猫细小病毒的全基因组序列,选择保守区域设计并合成2对特异性引物,通过PCR扩增10株犬、猫细小病毒的主要基因NS1和VP2基因,将其克隆入pDM19-T载体,经测序拼接后,分析其遗传变异情况。通过DNAStar软件分析,分离到的10株犬、猫细小病毒和参考序列NS1基因的同源性为98.1%00%,VP2基因的同源性为97.1%9.9%。犬、猫细小病毒NS1蛋白上主要是散发的点突变,两者的主要差异集中在VP2蛋白上,氨基酸序列的第93、103、323位点和第80、546、584位点的氨基酸残基决定了犬、猫细小病毒的宿主特异性及抗原性。另外,通过对犬细小病毒VP2蛋白关键氨基酸位点对比分析发现:CPV-A、CPV-B、CPV-D毒株属于new CPV-2a型,CPV-C毒株属于new CPV-2b型。通过对VP2蛋白亲水性和抗原指数分析,发现VP2蛋白氨基酸区域:aa5a45和aa350a420的亲水性和抗原指数高,有�

关 键 词： 犬猫细小病毒 基因 基因 遗传变异

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