导　　师： 翁亚彪;王刚

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 猪球虫病是寄生于猪肠道上皮细胞的艾美耳属球虫和等孢属球虫引起，以腹泻和消瘦为主要症状。国内外报道的猪球虫种类较多，经形态学和特异 PCR方法鉴定，目前有10种艾美耳球虫和1种等孢球虫被确认为有效种。不同品种和生长阶段的猪均能感染猪球虫，其中哺乳期仔猪对猪等孢球虫（Isospora suis）的易感性最高，临床常出现水样腹泻，而其他阶段的猪则多为隐性感染。猪等孢球虫流行广泛，给养殖业带来巨大的经济损失。解决等孢球虫病问题，首先应从诊断开始，常规诊断方法存在检测率低等诸多问题。因此，本研究通过传统猪球虫检测方法的改良和猪等孢球虫18SrRNA基因序列的特异PCR方法的建立，探索检测率高，操作简便的检测方法。猪球虫检测方法常用的是饱和盐水漂浮法。但饱和盐水漂浮法用到乳猪的球虫检测时，存在很多问题。产生问题的原因是，乳猪阶段营养来源完全靠母乳，此阶段由于猪的消化系统发育不完全再加上体抗力弱，消化道很容易损伤，消化道损伤导致肠道不能完全吸收脂肪、蛋白质等营养物质，从而粪便成分常常含有未吸收完全的蛋白质、脂肪等物质。当使用饱和盐水漂浮法检测猪球虫时，由于蛋白质盐析和脂肪一同漂浮于液表，影响镜检时的观察视野。因此，本研究利用猪球虫在高比重溶液可被漂浮的原理，选用尿素作为溶质的漂浮法取代现临床上惯用的饱和食盐水漂浮法，饱和尿素溶液的比重与饱和食盐水相当，且能使蛋白质变性，同时使用皂粒（主成分为高级脂肪酸纳）除去脂肪，再用硅酸盐除泡剂解决检测过程的气泡问题。在临床模拟实验中，发现改良漂浮法观察到的卵囊数远远多于饱和食盐水漂浮法（近20倍）；通过对三个猪场进行检测临床检测发现，阳性率分别由5%，5%和10%提高至35

关 键 词： 生猪养猪 孢球虫感染 粪便检验 技术

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