导 师: 黄为民
授予学位: 硕士
作 者: ();
机构地区: 南方医科大学
摘 要: 近年,侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)成为新生儿重症监护室(neonatal intensive care unit,NICU)院内感染的重要原因。IFI仍然是早产儿死亡和发病的重要原因。由于新生儿侵袭性真菌感染的临床表现没有特异性,延迟以及错误诊断及治疗的情况时有发生。该病进展迅速,判断真菌感染所需的长时间等待往往导致抗真菌药物开始治疗的延迟。因此,早期准确地识别真菌感染是至关重要的。 目前,真菌感染诊断的黄金标准仍然是血液或脑脊液等无菌体液培养阳性或显微镜下发现真菌。据报道,真菌的血培养阳性率为8%。真菌培养需时较长,培养出真菌的时间为3d,加之新生儿侵袭性真菌感染的临床表现缺少临床症状和体征,病情进展迅速,容易错失最佳的诊治时间。 近年来,分子方法,如PCR检测,逐渐崛起成为有可能代替传统检测真菌感染的方法。分子检测方法具有更高的灵敏度,允许在临床样品中检测少量DNA,更适用于新生儿。 近来,液滴数PCR(ddPCR)已被广泛用于检测临床标本中的病原体负荷,并可直接定量靶基因。该技术是将样品分成数干纳米液滴,然后通过PCR扩增,并检测荧光信号。为了分析荧光信号,每个事件(液滴)被定义为目标探针的正或负事件。由于DNA片段以随机和独立的方式被分离成液滴,所以原始样本中的绝对拷贝数可以通过泊松算法来确定。近年来,DDPCR技术在疾病病因、诊断和治疗效果分析中得到了广泛的应用,效果显著。 本研究的目的是建立一种基于ddPCR技术检测真菌的方法,并探讨此方法在快速、精确检测NICU内IFI中的临床应用价值。 研究目的: 探讨微滴式数字PCR(ddPCR)技术在快速、精确诊断新生儿侵袭性真菌感染(IFI)中的临床应用价值。 研究方法: 选择真菌高度保�